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申请/专利权人：河北钧兴生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种以动物眼角膜为原料制备IV胶原的方法，所述方法包括以下步骤：原料预处理、冷冻干燥、研磨粉碎、乙酸溶解、层析分离、超滤除杂、冷冻干燥，经过冷冻干燥的冻干品即为以动物眼角膜为原料制备的IV型胶原。在制备过程中未使用生物酶进行降解，在保留IV型胶原三螺旋的结构同时，最大程度上保留了端肽的完整性。制备过程中使用了亲和层析技术，IV胶原纯度高。
主权项：1.一种以动物眼角膜为原料制备IV胶原的方法，所述方法包括以下步骤：1原料预处理：将动物眼角膜去除附着物后洗涤，利用机械法将动物眼角膜切成颗粒状，浸泡于有机溶剂后离心，收集颗粒物并将其置于含有变性剂的溶液中浸泡，离心后收集动物眼角膜颗粒物；2冷冻干燥：将步骤1制备的动物眼角膜颗粒物进行冷冻干燥，冻干物含水量控制在4％以下；3研磨粉碎：将步骤2制备的冻干物进行粉碎，颗粒物的粒径尺寸控制在0.5m～500m范围内；4乙酸溶解：将步骤3制备的颗粒物悬浮于pH小于4.0的有机酸溶液中，超声震荡处理1h～24h，离心后收集上清液，利用碱溶液将上清液pH值调制4.0～8.5范围内，以获得碱溶液处理后的上清夜；5层析分离：将步骤4获得的碱溶液处理后的上清液上样至亲和层析柱，使用缓冲液洗涤亲和层析柱，使用洗脱液进行层析洗脱，收集流出的色谱峰溶液；6超滤除杂：将步骤5收集的色谱峰溶液，利用超滤膜进行处理1～3次，收集截留液；7冷冻干燥：将步骤6收集的截留液进行冷冻干燥，冻干品即为以动物眼角膜为原料制备的IV型胶原。
全文数据：
权利要求：
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