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一种以合子胚为外植体的落叶松快繁方法 

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申请/专利权人:南京林业大学;中国林业科学研究院林业研究所

摘要:本发明公开了一种以合子胚为外植体的落叶松快繁方法,属于植物快繁技术领域。本发明以落叶松合子胚为外植体,在添加了2mgL2,4‑D和0.5mgL6‑BA的DCR培养基中成功诱导出胚性胚柄团,并以麦芽糖作为碳源进行增殖培养提高了体胚发生效率。响应面优化模型显示,影响杂交落叶体细胞胚诱导数量的因素,98.54%来源于PEG、ABA和PSK,经优化最终得到杂交落叶松体胚最佳诱导条件为PEG207.45]gL,ABA10.563mgL,PSK0.543mgL,最高体胚诱导数量为52.2个克胚性胚柄团,经体细胞胚萌发培养基培养后生根成苗。本发明为杂交落叶松的良种扩繁奠定了基础。

主权项:1.一种以合子胚为外植体的落叶松快繁方法,其特征在于,步骤包括:1取未成熟落叶松合子胚作为外植体,接种于胚性胚柄团诱导培养基中培养获得胚性胚柄团;2将胚性胚柄团转移至增殖培养基中培养;3将增殖后的胚性胚柄团转移至体细胞胚诱导培养基中培养获得体胚;4将体胚转移至体细胞胚萌发培养基中培养,生根成苗;步骤1中所述胚性胚柄团诱导培养基具体为:DCR培养基+2,4-D2~10mgL+6-BA0.5mgL+维生素C10mgL+水解酪蛋白0.5gL+麦芽糖20gL+琼脂2.4gL,pH5.8;步骤2中增殖培养基具体为:DCR培养基+2,4-D2mgL+6-BA0.5mgL+维生素C10mgL+水解酪蛋白0.5gL+麦芽糖20gL+琼脂2.4gL,pH5.8;步骤3中体细胞胚诱导培养基具体为:12DCR基本培养基+PEG207.5gL+ABA10.6mgL+PSK0.5mgL+GA5mgL+维生素C10mgL+水解酪蛋白0.5gL+水晶洋菜2.8gL+麦芽糖25gL,pH5.8;步骤4中体细胞胚萌发培养基具体为:DCR基本培养基+维生素C10mgL+蔗糖20gL+琼脂8gL,pH5.8。

全文数据:

权利要求:

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