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申请/专利权人:贵州大学
摘要:本发明公开了一种Didymellasegeticola菌丝原生质体的制备方法,属于生物技术领域。原生质体的制备方法包括将D.segeticola菌丝培养约7d,采用灭菌蒸馏水清洗,并转至YEPD液体培养基中培养;然后采用崩溃酶、溶壁酶和蜗牛酶的混合酶解液对菌丝进行酶解、过滤、离心,即得到D.segeticola菌丝原生质体。本发明表明D.segeticola的菌丝原生质体可为研究该菌的致病机制及杀菌剂创制提供重要的实验材料。
主权项:1.一种Didymellasegeticola菌丝原生质体的制备方法,其特征在于:1新鲜菌丝制备:将D.segeticola菌碟接种于燕麦粉琼脂培养基培养,后再用灭菌水冲洗,菌悬液转至液体培养基YEPD,摇培,过滤得到D.segeticola的新鲜菌丝;2酶解处理:以氯化钠溶液作为渗透压稳定剂,配制崩溃酶Drislase、溶壁酶LysingEnzyme和蜗牛酶Snailase的混合酶解液;将步骤1获得的新鲜菌丝加入酶解液中,摇床酶解;3原生质体收集:将步骤2获得的酶解液经灭菌的2-3层擦镜纸过滤,并用氯化钾冲洗,所得滤液离心,取沉淀,即为D.segeticola原生质体。
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权利要求:
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