Document
拖动滑块完成拼图
首页 专利交易 科技果 科技人才 科技服务 国际服务 商标交易 会员权益 IP管家助手 需求市场 关于龙图腾
 /  免费注册
到顶部 到底部
清空 搜索

利用PiggyBac转座系统构建稳定基因敲低细胞株的方法及其应用 

买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!

申请/专利权人:右江民族医学院

摘要:本发明公开了一种利用PiggyBac转座系统构建稳定基因敲低细胞株的方法。包括以下步骤:将U6启动子整合到PiggyBacDualpromoter载体中,得到PB‑U6P载体;将基因敲低片段连接至PB‑U6P载体;再将基因敲低载体PB‑U6P和SuperPiggyBacTransposase载体按照摩尔比1:1混合后转染真核细胞系中;利用嘌呤霉素对转染细胞系进行筛选;利用RT‑qPCR和WesternBlot对进行鉴定,获得稳定基因敲低细胞株。

主权项:1.利用PiggyBac转座系统构建稳定基因敲低细胞株的方法,其特征在于,具体步骤如下:1将包含多克隆位点和U6启动子的基因合成序列通过同源重组将PiggyBacDualpromoter载体中的CMV启动子替换,得到PB-U6P载体。2将靶标基因的敲低片段连接到步骤1中的PB-U6P载体,位于U6启动子下游,即可构建成基因敲低载体PB-U6P-Shgene。3将PB-U6P-Shgene和SuperPiggyBacTransposase载体混合后,转染至细胞株中。利用嘌呤霉素进行稳转细胞株筛选。4对步骤3中稳转细胞株进行RT-qPCR和WesternBlot检测,鉴定目标基因敲低的效果。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 右江民族医学院 利用PiggyBac转座系统构建稳定基因敲低细胞株的方法及其应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。