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一种瘢痕疙瘩类器官培养基及培养方法 

申请/专利权人:赛领生物科技(南京)有限公司

申请日:2023-10-17

公开(公告)日:2024-05-07

公开(公告)号:CN117343904B

主分类号:C12N5/09

分类号:C12N5/09;A01N1/02

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.05.07#授权;2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要:本发明公开了一种瘢痕疙瘩类器官培养基及培养方法,涉及类器官培养领域,所述瘢痕疙瘩类器官培养基包括基础培养基advancedDMEMF12及特异性添加因子,所述特异性添加因子包括以下成分:primocin、HEPES、GlutaMAX、B‑27无血清添加剂、N‑acetyl‑L‑cysteine、mEGF、hFGF10、hR‑spondin1、Afamin‑Wnt3A和Nicotinamide;本发明的瘢痕疙瘩类器官培养基针对瘢痕疙瘩组织来源细胞的生长特点,能够成功培养出瘢痕疙瘩类器官,并结合类器官传代、冻存技术可以在有限时间内获得足量类器官开展科学研究并保存样本。

主权项:1.一种瘢痕疙瘩类器官的建立方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一、将瘢痕疙瘩组织预处理得到瘢痕疙瘩细胞;步骤二、建立瘢痕疙瘩类器官;将瘢痕疙瘩细胞与基质胶混合,置于37℃,5%CO2细胞培养箱中,待基质胶凝固后,加入瘢痕疙瘩类器官培养基,再次置于37℃,5%CO2细胞培养箱培养,每隔4天换一次培养基,培养4天-28天后得到瘢痕疙瘩类器官;所述瘢痕疙瘩类器官培养基由基础培养基advancedDMEMF12及特异性添加因子组成,所述特异性添加因子为以下成分:primocin、HEPES、GlutaMAX、B-27无血清添加剂、N-acetyl-L-cysteine、mEGF、hFGF10、hR-spondin1、Afamin-Wnt3A和Nicotinamide;所述特异性添加因子中各成分在瘢痕疙瘩类器官培养基中的终浓度如下:primocin,0.5~5×;HEPES,1~100mM;GlutaMAX,0.2~20mM;B-27无血清添加剂,0.5~10×;N-acetyl-L-cysteine,0.1~200mM;mEGF,1~300ngml;hFGF10,1~500ngml;hR-spondin1,0.1~50mgml;Afamin-Wnt3A,5~50%体积浓度;Nicotinamide,0.1~200mM。

全文数据:

权利要求:

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