申请/专利权人：华南农业大学

申请日：2023-12-27

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN118005769A

主分类号：C07K14/78

分类号：C07K14/78;C12P21/06;C07K7/06;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;A23L33/18;A61K38/08;A61P37/02

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开

摘要：本发明涉及活性肽技术领域，具体涉及一种具有提高免疫力活性的七肽及其应用。为了丰富提高免疫活性因子的种类，本发明提供一种分离自鲟鱼软骨的胶原蛋白肽组分F2‑7以及分离自F2‑7的多肽HVPLPLP。本发明首先使用生物信息学手段，如肽段活性、毒性预测工具和分子对接技术等，验证合成肽的免疫活性及其发挥免疫调节的机制。在此基础上，选取RAW264.7巨噬细胞，通过检测细胞的增殖能力、吞噬能力和NO的释放量等免疫活性指标进一步对所述七肽的免疫活性进行体外评价，确定所述七肽是一种具有体外免疫调节活性的多肽，可应用于食品、保健品、生物制药等领域。

主权项：1.一种鲟鱼软骨肽，其特征在于，所述鲟鱼软骨肽是以鲟鱼软骨为原料，经过酶解、SephadexG-15葡聚糖凝胶层析柱纯化、DEAE-52阴离子层析柱纯化以及反相高效液相色谱法进一步纯化后获得的F2-7组分；所述F2-7组分的制备方法如下：1酶解：称取鲟鱼软骨→加水熬煮→待冷却后加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶→调节pH至9.0→恒温磁力搅拌器搅拌，酶解→高温灭酶→冷却→离心→取上清液真空浓缩→冷冻干燥，即得鲟鱼软骨酶解物；2SephadexG-15葡聚糖凝胶层析柱纯化：将鲟鱼软骨酶解物采用SephadexG-15葡聚糖凝胶层析柱纯化，经一级水洗脱，收集主要吸收峰组分，得鲟鱼软骨肽组分一；3DEAE-52阴离子层析柱纯化：将鲟鱼软骨肽组分一经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱，利用纯水、浓度为0.1molL的氯化钠溶液依次洗脱后，收集主要吸收峰，得鲟鱼软骨肽组分二F2；4反相高效液相色谱法纯化：将鲟鱼软骨肽组分二F2用反相高效液相色谱仪分离纯化，用洗脱液梯度洗脱，洗脱液分别为洗脱液A0.1％的三氟乙酸-水和洗脱液B0.1％三氟乙酸-乙腈，0～3min，洗脱液A体积百分比恒定为95％；3～10min，洗脱液A体积百分比由95％降到80％；10～20min，洗脱液A体积百分比由80％降到50％；20～23min，洗脱液A体积百分比由50％降到20％；23～25min，洗脱液A体积百分比由20％升到95％；25～35min,洗脱液A体积百分比恒定为95％；时间为35min，流速1mLmin，柱温35℃，在280nm和220nm下双波长进行检测；收集出峰时间为20.8min～22.6min的洗脱液，经减压浓缩、真空冷冻干燥，得鲟鱼软骨肽目标组分F2-7。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华南农业大学 一种富含疏水氨基酸的鲟鱼软骨胶原蛋白免疫肽及其应用

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