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申请/专利权人：中山大学
摘要：本发明公开了一种黄鳝生长催乳素抗血清及其制备方法与应用，该抗血清通过构建含有SEQIDNO:4所示核酸分子的表达质粒，转染细菌获得重组菌，使用异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导表达，分离纯化得到黄鳝Sml抗原，然后将黄鳝Sml抗原常规免疫试验动物，三次免疫后收集血清，即得黄鳝生长催乳素抗血清。该方法操作简单、制备高效，制备的得到的抗血清效价高，可达到可达1：4096000以上，而且特异性强，不会受到其他垂体激素的干扰。
主权项：1.一种制备黄鳝生长催乳素抗血清的方法，包括以下步骤：（1）构建含有抗原多肽的表达质粒，转染细菌获得重组菌，使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达，分离纯化得到黄鳝生长催乳素抗原，所述抗原多肽的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示；（2）将纯化的黄鳝生长催乳素抗原免疫试验动物，三次免疫后收集血清，即得黄鳝生长催乳素抗血清；所述动物为新西兰大白兔或小鼠；所述步骤（2）具体如下：将300μL黄鳝生长催乳素抗原加入等体积弗氏完全佐剂，充分混匀后进行振荡乳化，得到初次免疫抗原；将初次免疫抗原通过背部皮内多点注射新西兰大白兔，每点约50μL，以进行初次免疫；在初次免疫后第3天进行再次免疫，抗原准备过程、抗原注射量及免疫方法同首次免疫；在初次免疫后第28天进行第三次免疫，取300μL纯化黄鳝生长催乳素抗原，加入等体积弗氏不完全佐剂充分乳化，通过背部皮内多点注射新西兰大白兔，每点约50μL；在初次免疫后第35天，收集血清，即得到黄鳝生长催乳素抗血清；所述黄鳝生长催乳素抗原的浓度为1μgμL；所述SEQIDNO:4所示核酸序列使用如下引物对通过PCR扩增得到；所述引物对的核苷酸序列为：上游引物F：5’-GAGACCATGGGCATCCCATTAGTCTGTAAGGAGGAGC-3’；下游引物R：5’-GAGAGGATCCCTATGCACAGTTATATATGTCAGTTTGT-3’。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中山大学 一种黄鳝生长催乳素抗血清及其制备方法与应用
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