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一种蚕豆外植体防褐化的愈伤组织培养方法 

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申请/专利权人:甘肃农业大学

摘要:本发明涉及蚕豆的组培领域,具体涉及一种蚕豆外植体防褐化的愈伤组织培养方法,包括如下步骤:1种子消毒:将蚕豆种子用水冲洗干净,消毒剂浸泡消毒,用无菌水冲洗,再用酒精浸泡消毒,用无菌水冲洗;2无菌苗培养;3蚕豆外植体的防褐培养及愈伤组织诱导培养;步骤1所述的消毒剂为升汞溶液、过氧化氢溶液或次氯酸钠溶液中的一种;步骤3所述的防褐溶液为半胱氨酸溶液、柠檬酸溶液或双蒸水中的一种,所述的方法具有操作简便、消毒剂廉价易得,安全性好,且废液处理容易,绿色环保、蚕豆无菌苗获得率高,品质好、防褐处理过后的外植体褐化率为0,且具有较高的愈伤组织诱导率。

主权项:1.一种蚕豆外植体防褐化的愈伤组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:1种子的消毒:将蚕豆种子用自来水冲洗干净,消毒剂消毒,用无菌水冲洗,再用酒精浸泡消毒,无菌水冲洗;2无菌苗培养:将步骤1得到的蚕豆种子置于18-25℃无菌环境中用无菌水浸泡36h,使其吸水膨胀后,将种皮剥去,横平放置接种于MS培养基上,置于23±2℃黑暗培养,3d后移入光照2000lx,光周期16h8h,白天温度为25℃,黑夜温度为18℃,10d后即可长成高5-10cm的蚕豆无菌苗;3蚕豆外植体的防褐化培养:在超净工作台上,从无菌苗上取下茎段,放入防褐溶液中浸泡2h,然后用无菌滤纸吸干水分,接种到诱导培养基上,置于20±2℃黑暗中诱导,即可长出愈伤组织;步骤1所述的消毒剂为10%过氧化氢溶液,消毒时间为10min;步骤3所述的防褐溶液为0.1gL半胱氨酸溶液,浸泡时间为0.5~3h;所述的诱导培养基为MS+植物生长激素;激素名称及浓度为:0.5~4mgL2,4-D,0.3~2.1mgL6-BA。

全文数据:

权利要求:

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