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一种菰黑粉菌原生质体的制备及其转化方法 

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申请/专利权人:金华市农业科学研究院(浙江省农业机械研究院)

摘要:本发明提供了一种菰黑粉菌原生质体的制备及其转化方法,解决了现有技术中菰黑粉菌原生质体制备过程复杂且细胞壁去除不完全,导致菰黑粉菌原生质体的转化效率低的技术问题。通过将黑粉菌浸泡在酶解液中获得黑粉菌原生质体,与携带G418抗性基因的pKNT‑GFP质粒混合,再加入STC‑PEG缓冲液,并在含有抗生素的培养基中培养获得转化子。本发明通过优化酶解液制备菰黑粉菌原生质体,将细胞壁去除干净。再通过PEG介导对菰黑粉菌原生质体进行转化,不仅可以避免使用植物病毒或农杆菌等生物质载体带来的不利影响,有效提高了基因转化的稳定性,还具有操作简便、成本低和转化效率高的特点,为菰黑粉菌侵染茭白的研究提供了理想的实验基础。

主权项:1.一种菰黑粉菌原生质体的制备方法,其特征在于,包括:S1、将菰黑粉在酶解液中进行酶解,所述酶解液包括崩溃酶、蜗牛酶、溶壁酶和SCS溶液,浸泡后得到含有菰黑粉菌的酶解液;S2、将所述含有菰黑粉菌的酶解液离心后得到沉淀,将沉淀清洗后得到菰黑粉菌原生质体。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 金华市农业科学研究院(浙江省农业机械研究院) 一种菰黑粉菌原生质体的制备及其转化方法

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