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一种PBMC细胞块及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:河北医科大学第二医院

摘要:本发明属于生物医学技术领域,具体公开一种PBMC细胞块及其制备方法和应用。本发明提供的制备方法,选择乙醇和脱脂牛奶作为固定剂,二者产生协同作用,通过抑制PBMC的细胞内酶活性,减少细胞代谢活动,从而保持细胞形态和结构的稳定性;二者作用还可以在PBMC表面形成一层保护层,减少细胞损伤,保证细胞完整性,使细胞在进一步处理过程中不被破坏,保持细胞形态和结构的稳定性;乙醇和脱脂牛奶之间通过发生反应,可以将PBMC均匀的分布在反应物中,使细胞分散开来,进一步保持细胞形态和结构的稳定性。本发明提供的制备方法操作简便,易于掌握,适用于范围广,可以长期保存PBMC的形态和结构,便于后续的分析和应用。

主权项:1.一种PBMC细胞块的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将人外周血淋巴细胞分离液加至外周血中,于3.5℃-4.5℃、6000rpm-6100rpm条件下离心,由上至下取离心后液体的第二层,得环状乳白色淋巴细胞;S2、向所述环状乳白色淋巴细胞中加入清洗液,于3.5℃-4.5℃、6000rpm-6100rpm条件下离心,弃上清液,得第一处理环状乳白色淋巴细胞;S3、向所述第一处理环状乳白色淋巴细胞中加入清洗液,于3.5℃-4.5℃、6000rpm-6100rpm条件下离心,弃上清液,得第二处理环状乳白色淋巴细胞;S4、向所述第二处理环状乳白色淋巴细胞中加入固定剂,混合均匀,于3.5℃-4.5℃、6000rpm-6100rpm条件下离心,保留沉淀物,得所述PBMC细胞块;其中,所述固定剂为乙醇和脱脂牛奶的混合物。

全文数据:

权利要求:

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