申请/专利权人：陕西省西安植物园(陕西省植物研究所)

申请日：2024-03-22

公开（公告）日：2024-05-28

公开（公告）号：CN117949579B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/72;G01N30/86;G01N30/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.28#授权;2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开

摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种生物降解物木质素甲氧基稳定同位素比值的检测方法。本发明利用物理化学和植物化学手段对生物降解物进行木质素物质提纯，利用选择性有机化学取代反应进行木质素甲氧基置换，获得稳态顶空碘甲烷气体，通过气相色谱‑气体稳定同位素比值质谱仪，分别以高温氧化和高温裂解模式进行稳定碳同位素比值和稳定氢同位素比值的量化标定。本发明所得生物降解物木质素甲氧基稳定碳和稳定氢同位素比值的相对标准偏差分别小于0.15‰和0.50‰，为有效利用木质素甲氧基稳定同位素比值指征农林园林生物质生物降解过程和参与生物地球化学碳、水循环提供一种新的技术方案。

主权项：1.一种生物降解物木质素甲氧基稳定同位素比值的检测方法，其特征在于，包括：将生物降解物进行预处理获得细粉样品，将所述细粉样品经过提纯得到木质素物质，将所述木质素物质经过有机化学反应衍生获得顶空碘甲烷气体，通过气相色谱-气体稳定同位素比质谱仪测定所述顶空碘甲烷气体得到木质素甲氧基稳定同位素比值；所述提纯包括以生物降解前体物为反应底物的提纯或以生物降解中间物和或终产物为反应底物的提纯；所述以生物降解前体物为反应底物的提纯为：以类离子液体氯化锌水合物和离子液体1-乙基-3-甲基咪唑氯化铁的等比例混合物作为第一双相提取体系，将所述第一双相提取体系和所述生物降解前体物按照质量比为4~15:1进行混合，21~23℃调节pH至4~5，密封80℃微波反应10~20min，-2~2℃淬灭反应，得到第一反应产物，使用乙酸乙酯对所述第一反应产物萃取2~3次，减压旋蒸后得到木质素物质；所述以生物降解中间物和或终产物为反应底物的提纯为：以类离子液体硫酸亚铁铵六水合物和离子液体1-乙基-3-甲基咪唑氯化铁的等比例混合物作为第二双相提取体系，将所述第二双相提取体系和所述生物降解中间物和或终产物按照质量比为3~15:1进行混合，加入与所述生物降解中间物和或终产物等质量的氧化铜，调节pH至8~9，60~180℃密封微波反应60~80min，-2~2℃淬灭反应，得到第二反应产物，使用乙酸乙酯对所述第二反应产物萃取2~3次，减压旋蒸后得到木质素物质；所述生物降解物为生物降解前体物、生物降解中间物和或终产物；所述生物降解前体物包括枯枝落叶层凋落物、园林园艺生产废弃物；所述生物降解中间物和或终产物包括腐殖质土壤、沉积物泥炭；所述木质素物质为木质素单体和或保留间位甲氧基的木质素酚、醛衍生混合物；所述有机化学反应衍生为：以mgμmoL计，将所述木质素物质与氢碘酸按照8~12:3.65的比例混合，110~130℃避光密封微波反应20~40min，21~23℃静置40~60min，得到顶空碘甲烷气体；所述木质素甲氧基稳定同位素比值为木质素甲氧基稳定碳同位素比值和稳定氢同位素比值。

全文数据：

权利要求：

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