申请/专利权人：华南农业大学

申请日：2024-03-11

公开（公告）日：2024-06-28

公开（公告）号：CN118258919A

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/72;G01N30/04;G01N30/86;G01N30/88

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.28#公开

摘要：本发明提供一种生物样本中法尼基焦磷酸和香叶基香叶基焦磷酸的检测方法，涉及小分子代谢物检测领域。所述生物样本为血清样本、肝脏组织样本或细胞样本，该方法包括：样本前处理、仪器检测和含量测定的步骤。本发明针对不同的生物样本提出了不同的前处理方法，通过对三种类型的生物样本前处理进行优化，有效的降低了生物样本中的干扰因素，实现了对样本中的目标检测物的富集，进一步提高了痕量法尼基焦磷酸FPP和香叶基香叶基焦磷酸GGPP的检测灵敏度和分析特异性。本发明提供的检测方法适用于生物样本中FPP和GGPP，对理解他汀类药物的作用机制以及进一步拓展其在肿瘤治疗、免疫调节等领域的应用具有重要意义。

主权项：1.一种生物样本中法尼基焦磷酸和香叶基香叶基焦磷酸的检测方法，其特征在于，所述生物样本为血清样本、肝脏组织样本或细胞样本，所述方法包括以下步骤：1样本前处理针对血清样本，所述样本前处理的方法包括：取血清样本，加入三氯乙酸溶液进行蛋白沉淀，离心；取上清液，加入纯化水，过混合型弱阴离子交换SPE板，依次用甲酸水溶液和甲酸甲醇溶液进行淋洗，用氨水甲醇溶液进行洗脱；洗脱液氮气吹干，用甲醇水溶液复溶待测；针对肝脏组织样本，所述样本前处理方法包括：称取肝脏组织样本，加入纯化水，进行组织匀浆；低速离心，加入碳酸氢铵甲醇溶液再次匀浆；高速离心，取上清液，加入正己烷；高速离心，取下层液氮气吹干，用甲醇水溶液复溶待测；针对细胞样本，所述样本前处理方法包括：取细胞样本加入含碳酸氢铵-乙酸的甲醇溶液，进行超声波细胞粉碎；高速离心，取上清液，氮气吹干，用甲醇水溶液复溶待测；2仪器检测采用超高效液相色谱串联质谱法对前处理后的样品进行检测，其中，色谱条件包括：流动相由A相和B相组成，A相为10mmolL碳酸氢铵水溶液，B相为含有10mmolL碳酸氢铵和0.1％氨水的80％乙腈水溶液；按如下梯度洗脱程序进行洗脱：0.00～0.50min，A：95％，B：5％；0.50～4.00min，A：95％→42％，B：5％→58％；4.00～4.50min，A：42％→0％，B：58％→100％；4.50～5.50min，A：0％，B：100％；5.50～5.70min，A：0％→95％，B：100％→5％；5.70～6.50min，A：95％，B：5％；3含量测定根据标准曲线法计算生物样本中法尼基焦磷酸和香叶基香叶基焦磷酸的含量。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华南农业大学 一种生物样本中法尼基焦磷酸和香叶基香叶基焦磷酸的检测方法

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