申请/专利权人：天康生物制药有限公司

申请日：2018-12-26

公开（公告）日：2024-05-31

公开（公告）号：CN109470760B

主分类号：G01N27/447

分类号：G01N27/447

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.31#授权;2023.05.05#专利申请权的转移;2019.04.09#实质审查的生效;2019.03.15#公开

摘要：本发明提供了一种用于制备琼脂糖凝胶的装置、琼脂糖凝胶电泳方法和应用，涉及电泳技术领域。该装置包括制胶平台、凝胶托盘、加样梳和储胶容器；制胶平台设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽A，两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B和贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；该装置通过制备两端具有加样孔的琼脂糖凝胶配合储胶容器，以达到制备用于重复利用的琼脂糖凝胶的目的。该琼脂糖凝胶电泳利用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的可重复使用的琼脂糖凝胶进行电泳，可在电泳前免于制胶，简化了实验流程。

主权项：1.一种琼脂糖凝胶电泳方法，其特征在于，包括：使用用于制备琼脂糖凝胶的装置制备琼脂糖凝胶；在琼脂糖凝胶一侧的若干点样孔内加入待测样品然后进行凝胶电泳，将电泳后的琼脂糖凝胶置于储胶容器内保存；待下一次使用时将待测样品加入另一侧的若干点样孔内进行凝胶电泳；所述用于制备琼脂糖凝胶的装置包括：制胶平台、至少一个凝胶托盘、至少两个加样梳和储胶容器；所述制胶平台设置有至少一个用于放置所述凝胶托盘的凹槽A，所述凹槽A的内侧壁与所述凝胶托盘两侧的凸缘相接触；所述凹槽A的侧壁上设置有用于可拆卸固定两个加样梳的若干第一卡槽；所述两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；所述储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B；所述储胶容器中还设置有贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；所述储胶容器还包括用于密封储胶容器的密封装置；使用时，将凝胶托盘放置于制胶平台的凹槽A中，然后将两个加样梳固定于凹槽A中，待凝胶冷却后取出加样梳；将经过凝胶电泳的琼脂糖凝胶或未使用的琼脂糖凝胶置于凝胶托盘内放入储胶容器，浸没于缓冲液后密封贮存。

全文数据：用于制备琼脂糖凝胶的装置、琼脂糖凝胶电泳方法和应用技术领域本发明涉及电泳技术领域，尤其是涉及一种用于制备琼脂糖凝胶的装置、琼脂糖凝胶电泳方法和应用。背景技术核酸电泳是用凝胶作为支持电泳介质的，具有分子筛效应的一种电泳方法，具有分辨率高、分离范围广等优点，是核酸研究中不可缺少的重要实验手段。其中琼脂糖凝胶电泳是最常用的凝胶电泳技术，适用于核酸电泳，是分离鉴定和纯化核酸片段的标准方法。在核酸实验中最常用的凝胶电泳为琼脂糖凝胶电泳，是序列扩增，核酸研究等分子生物学实验中不可或缺的重要分析方法，目前被广泛运用于分离、鉴定纯化核酸片段。目前每次进行核酸电泳实验前都需要现场配制琼脂糖凝胶，且该凝胶多为一次性使用，导致实验时间与实验成本的浪费。有些实验室为了节约成本，常将一次试验后有孔剩余的凝胶放于4℃冰箱保存用于二次使用，但这会引起核酸染料的降解，使检测的灵敏度降低。有鉴于此，特提出本发明。发明内容本发明的第一目的在于提供一种用于制备琼脂糖凝胶的装置，缓解了现有技术中存在的琼脂糖凝胶无法反复使用的技术问题。本发明的第二目的在于提供一种琼脂糖凝胶电泳方法，该方法利用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的可重复使用的琼脂糖凝胶进行电泳。本发明的第三目的在于提供上述用于制备琼脂糖凝胶的装置或上述琼脂糖凝胶电泳方法在核酸检测中的应用。为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：本发明提供了一种用于制备琼脂糖凝胶的装置，所述装置包括：制胶平台、至少一个凝胶托盘、至少两个加样梳和储胶容器；所述制胶平台设置有至少一个用于放置所述凝胶托盘的凹槽A，所述凹槽A的内侧壁与所述凝胶托盘两侧的凸缘相接触；所述凹槽A的侧壁上设置有用于可拆卸固定两个加样梳的若干第一卡槽；所述两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；所述储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B；所述储胶容器中还设置有贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；所述储胶容器还包括用于密封储胶容器的密封装置；使用时，将凝胶托盘放置于制胶平台的凹槽A中，然后将两个加样梳固定于凹槽A中，待凝胶冷却后取出加样梳；将经过凝胶电泳的琼脂糖凝胶或未使用的琼脂糖凝胶置于凝胶托盘内放入储胶容器，浸没于缓冲液后密封贮存。优选地，所述储胶容器包括储胶盒体和储胶盖体；所述储胶盒体内设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B，所述凹槽B的侧壁低于储胶盒体侧壁。优选地，所述储胶盒体内设置有一个凹槽B，凹槽B相对的两个侧壁分别设置有用于放置可拆卸挡板的第二卡槽，可拆卸挡板将凹槽B分割成第二凹槽B和第三凹槽B。优选地，所述储胶盒体和所述储胶盖体的接触面设置有密封胶条。优选地，所述储胶盒体和所述储胶盖体可拆卸链接或铰接。优选地，所述凹槽B的深度与储胶盒体侧壁的高度比为1：2-5。本发明还提供了一种琼脂糖凝胶电泳方法，包括：使用权利要求1-6中任一项所述的用于制备琼脂糖凝胶的装置制备琼脂糖凝胶；在琼脂糖凝胶一侧的若干点样孔内加入待测样品然后进行凝胶电泳，将电泳后的琼脂糖凝胶至于所述储胶容器内保存；待下一次使用时将待测样品加入另一侧的若干点样孔内进行凝胶电泳。优选地，所述琼脂糖凝胶使用3-5次后，先将核酸染料与待测样品混合均匀后再加入加样孔。优选地，所述核酸染料与待测样品的体积比为1：5-10；所述核酸染料为体积百分比浓度为0.08％的核酸染料。本发明还提供了上述用于制备琼脂糖凝胶的装置或上述琼脂糖凝胶电泳方法在核酸检测中的应用。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明提供的用于制备琼脂糖凝胶的装置，通过制备两端具有加样孔的琼脂糖凝胶配合储胶容器，以达到制备用于重复利用的琼脂糖凝胶的目的。该装置制备出的琼脂糖凝胶可多次重复利用和保存，在保证电泳结果良好的情况下，节省了实验人员的时间与实验的成本。本发明提供的琼脂糖凝胶电泳方法，利用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的可重复使用的琼脂糖凝胶进行电泳，可在电泳前免于制胶，并且重复利用的琼脂糖凝胶与现制作的琼脂糖凝胶具有相似的检测灵敏度。因此本发明提供的琼脂糖凝胶电泳方法优化了实验流程，提高了实验效率。附图说明为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为实施例1提供的制胶平台侧面示意图；图2为实施例1提供的制胶平台的一面的示意图；图3为实施例1提供的制胶平台的另一面的示意图；图4为实施例1提供的储胶容器内储存有琼脂糖凝胶时的侧面示意图；图5为实施例1提供的一个储胶容器的示意图；图6为实施例1提供的另一个储胶容器的示意图；图7-A为实施例2提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第一次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图7-B为实施例2提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第三次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图7-C为实施例2提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第五次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图7-D为实施例2提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第六次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图7-E为实施例2提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第七次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-A为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第一次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-B为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第三次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-C为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第五次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-D为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第七次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-E为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第九次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-F为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-G为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十一次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-H为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十二次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-I为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十四次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-J为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十六次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度；图8-K为实施例3提供的琼脂糖凝胶电泳方法中，第十八次使用时琼脂糖凝胶的灵敏度。图标：100-制胶平台；111-第一凹槽A；122-第二凹槽A；123-第三凹槽A；130-第一卡槽；200-凝胶托盘；300-加样梳；400-储胶容器；410-凹槽B；422-第二凹槽B；423-第三凹槽B；430-第二卡槽；440-储胶盒体；450-储胶盖体；460-可拆卸挡板。具体实施方式下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。在本发明的描述中，需要说明的是，如出现术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等，其所指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，如出现术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，如出现术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。本发明提供了一种用于制备琼脂糖凝胶的装置，该装置包括：制胶平台、至少一个凝胶托盘、至少两个加样梳和储胶容器；其中，所述制胶平台设置有至少一个用于放置所述凝胶托盘的凹槽A，所述凹槽A的内侧壁与所述凝胶托盘两侧的凸缘相接触，以防止熔化的凝胶渗入制胶平台与凝胶托盘的缝隙；该凹槽A的侧壁上设置有用于可拆卸固定两个加样梳的若干第一卡槽；所述两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；所述储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B；所述储胶容器中还设置有贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；所述储胶容器还包括用于密封储胶容器的密封装置；本发明通过制备两端具有加样孔的琼脂糖凝胶配合储胶容器，以达到制备用于制备重复利用的琼脂糖凝胶的目的。使用时，将凝胶托盘放置于制胶平台的凹槽A中，然后将两个加样梳固定于凹槽A中，将一定浓度的琼脂糖融化后倒入制胶平台中，待凝胶冷却后取出加样梳。由于在凹槽A的两端各插入一个加样梳，因此可以在琼脂糖凝胶的上下两端分别制得一排加样孔。使用时先将待电泳的样品加入到一侧加样孔中进行电泳，电泳后将琼脂糖凝胶置于凝胶托盘内放入储胶容器，并浸没于缓冲液后密封贮存。待下一次使用时，将待测样品加入上一次未使用的加样孔中，然后进行电泳。由于在两次的电泳过程中，同一块琼脂糖凝胶在电泳槽中的方向是相反的，即第一次电泳时点样了的加样孔靠近负极，样品向着琼脂糖凝胶的中心移动；在第二次电泳时上述加样孔则靠近正极，因此琼脂糖凝胶中残留的上一次的样品将朝向琼脂糖凝胶外移动，直至上一次的样品移动至琼脂糖凝胶外，使上一次电泳时点样了的加样孔还可以继续在下一次使用。同时，由于琼脂糖凝胶在反复电泳和保存的过程中不易保存，因此本装置配有储胶容器，可以使经过凝胶电泳的琼脂糖凝胶或未使用的琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中，达到长期保存的目的。由上述可以看出，该装置制备出的琼脂糖凝胶可多次重复利用，易于贮存，在保证电泳结果良好的情况下，节省了实验人员的时间与实验的成本。在一些可选的实施方式中，所述储胶容器包括储胶盒体和储胶盖体；所述储胶盒体内设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B，所述凹槽B的侧壁低于储胶盒体侧壁。当放置于凝胶托盘的琼脂糖凝胶置于凹槽B内时，储胶盒体的上方还可以留有足够的空间以倒入缓冲液，可以使琼脂糖凝胶充分的浸没于缓冲液中，防止琼脂糖凝胶由于干燥造成的断裂，以延长使用寿命。在一些可选的实施方式中，所述储胶盒体内设置有一个凹槽B，凹槽B相对的两个侧壁分别设置有用于放置可拆卸挡板的第二卡槽，可拆卸挡板将凹槽B分割成第二凹槽B和第三凹槽B，以用于贮存多种尺寸的凝胶托盘及其盛放的琼脂糖凝胶。在一些优选的实施方式中，所述储胶盒体和所述储胶盖体可拆卸链接或铰接，并优选在储胶盒体和所述储胶盖体的接触面设置有密封胶条，以增强密封效果，以防止缓冲液漏出和减少缓冲液的挥发。在一些优选的实施方式中，所述凹槽B的深度与储胶盒体侧壁的高度比为1：2-5，例如可以为但不限于为1:2、1:2.5、1:3、1:3.5、1:4、1:4.5或1:5，优选为1：3-4，更优选为1:4。若储胶盒内凹槽B的侧壁的上沿距离储胶盒体的上沿距离过大时，会造成空间和缓冲液的浪费；若储胶盒内凹槽B的侧壁的上沿距离储胶盒体的上沿距离过小时，则预留给缓冲液的空间过小，一方面会造成用于浸没琼脂糖凝胶的缓冲液体积过少，琼脂糖凝胶容易干裂，另一方面会造成缓冲液容易溢出。因此选择合适的凹槽B的深度与储胶盒体侧壁的高度比，能够提高琼脂糖凝胶的保存效果。在本发明一个优选的实施方式中，用于制备琼脂糖凝胶的装置的尺寸参数如下时，制备和保存琼脂糖凝胶的效果更优：储胶盒体的内径为150mm×150mm，所述储胶盒体的高度为20mm；所述凹槽B的内径为135cm×135cm，深度为5mm。制胶平台的内径为120mm×120mm，凹槽A深10mm。凝胶托盘的尺寸包括60mm×120mm和或120mm×120mm。加样梳平行于凝胶托盘的长度为120mm的边固定；所述加样梳包括11孔的1mm齿和25孔的1mm齿的加样梳，1mm齿指的是加样梳的齿厚为1mm。本发明还提供了一种琼脂糖凝胶电泳方法，包括使用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备琼脂糖凝胶；在琼脂糖凝胶一侧的若干点样孔内加入待测样品然后进行凝胶电泳，将电泳后的琼脂糖凝胶至于所述储胶容器内保存；待下一次使用时将待测样品加入另一侧的若干点样孔内进行凝胶电泳。本发明提供的琼脂糖凝胶电泳方法，利用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的可重复使用的琼脂糖凝胶进行电泳，可在电泳前免于制胶，并且重复利用的琼脂糖凝胶与现制作的琼脂糖凝胶具有相似的检测灵敏度。因此本发明提供的琼脂糖凝胶电泳方法简化了实验流程，提高了实验效率。在一些优选的实施方式中，按照如下步骤实施本发明提供的琼脂糖凝胶电泳方法，效果更佳：a在第一次配制琼脂糖凝胶时，在凝胶凝固前加入核酸染料按照核酸染料说明书中的比例加入，倒入制胶平台中，在制胶平台的两端第一卡槽中分别插入两个加样梳，待凝胶冷却凝固后，进行核酸电泳。b在核酸电泳结束摄像后，或将制备完还未准备使用的琼脂糖凝胶放于凝胶托盘中，置于储胶容器中，在储胶容器里加入电泳缓冲液，密封储胶容器，放于4℃冰箱保存，待下次使用。c之后在重复使用时，每次进行核酸电泳时，都在与上次相反的另外一端加样孔中直接加入上样样品，使待检样品从负极向正极移动即可，而上一次实验存在于凝胶中的样品就会从另外一边迁移出凝胶从而避免了对待检样品的影响。每次实验结束后，都将该凝胶放于储胶容器中加入电泳缓冲液保存于4℃冰箱，可反复使用四次。在一些优选的实施方式中，在反复使用琼脂糖凝胶使用3-5次后，因核酸染料存在少量降解，为防止检测灵敏度的降低，在每次检测时将所加入的样品与核酸染料混合后再加入。在一些优选的实施方式中，使用体积百分比浓度为0.08％的核酸染料，与待测样品的体积比为1：5-10混合，例如可以为但不限于为1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10；当体积百分比浓度为0.08％的核酸染料与上样样品以1：6混合后电泳可达到最佳的电泳效果与检测灵敏度，可检测到约为0.5ng的DNA含量，其灵敏度与传统现配现用型的琼脂糖凝胶相当。本实施方式中所涉及的核酸染料，可以为市售的常见的核酸染料，例如可以为但不限于为EB、Goldview、GeneGreen、SYBRsafe或EcoDye等。通过优化核酸染料与待测样品的配比，可以使琼脂糖凝胶两周内反复使用十二次，其灵敏度与传统现配现用型的琼脂糖凝胶相当。本发明还提供了上述用于制备琼脂糖凝胶的装置或上述琼脂糖凝胶电泳方法在核酸检测中的应用，可应用于核酸样品的琼脂糖凝胶电泳检测，例如检测从组织或细胞中提取的DNA或PCR产物的检测等。实施例1本实施例提供了一种用于制备琼脂糖凝胶的装置，如图1-图6所示。该装置包括制胶平台100、凝胶托盘200、两套加样梳300和储胶容器400。该制胶平台100的两个面均设置有一个或若干个凹槽A，均深10mm。凹槽A的内侧壁与凝胶托盘200两侧的凸缘相接触，以防止融化的凝胶渗入制胶平台100与凝胶托盘200的缝隙。凹槽A的侧壁上设置有用于可拆卸固定两个加样梳300的若干第一卡槽130，使用时，两个加样梳300分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置。制胶平台100的一个面设置有第一凹槽A110，用于放置尺寸为120mm×120mm的凝胶托盘200，如图2所示。该制胶平台100的另一面设置有两个凹槽A，分别为第二凹槽A122和第三凹槽A123，如图3所示，第二凹槽A122和第三凹槽A123由凹槽A内与凹槽A的侧壁平行的凸条平均分割而成，用于放置尺寸为60mm×120mm的凝胶托盘200。该用于制备琼脂糖凝胶的装置包含尺寸分别为120mm×120mm和120mm×60mm的凝胶托盘200；两套加样梳300，每套加样梳300包含一个11孔的1mm齿的加样梳300和25孔的1mm齿的加样梳300，其中1mm齿表示加样梳300的齿厚为1mm。用于制备琼脂糖凝胶的装置还包含一个储胶容器400，由储胶盒体440和储胶盖体450组成，储胶盒体440和储胶盖体450铰接，并且接触面设置有密封胶条。储胶盒体440的内径为150mm×150mm，高度为20mm。储胶盒体440设置有凹槽B410，凹槽B410的深度为5mm，内径为135cm×135cm，用于放置尺寸为120mm×120mm的凝胶托盘200，凹槽B410的内径略大于凝胶托盘200的尺寸，以方便取用凝胶托盘200。凹槽B410相对的两个侧壁分别设置有第二卡槽430，分别设置于凹槽B410的相对的两个侧壁的中间，用于放置可拆卸挡板460。可拆卸挡板460平行于凹槽B410的侧壁，将凹槽B平均分割成第二凹槽B422和第三凹槽B423。第二凹槽B422和第三凹槽B423可以分别放置尺寸为120mm×60mm的凝胶托盘200。使用时，将凝胶托盘200放置于制胶平台100的凹槽A中，然后将两个加样梳300固定于凹槽A中，可以固定孔数相同或者不相同的加样梳300，如图1所示。将一定浓度的琼脂糖融化后倒入制胶平台100中，待凝胶冷却后取出加样梳300。由于在凹槽A的两端各插入一个加样梳300，因此可以在琼脂糖凝胶的上下两端分别制得一排加样孔。使用时先将待电泳的样品加入到一侧加样孔中进行电泳。电泳后将琼脂糖凝胶置于凝胶托盘200内放入储胶容器400中，并浸没于缓冲液后密封贮存。当贮存尺寸为120mm×120mm的凝胶托盘200及其盛放的琼脂糖凝胶时，直接放入储胶容器400的凹槽B410即可；当贮存尺寸为120mm×60mm的凝胶托盘200及其盛放的琼脂糖凝胶时，先将可拆卸挡板460插入第二卡槽430中，将凹槽B410分割成第二凹槽B422和第三凹槽B423，然后将尺寸为120mm×60mm的凝胶托盘200及其盛放的琼脂糖凝胶放入第二凹槽B422或第三凹槽B423中，也可以分别在第二凹槽B422或第三凹槽B423中同时贮存琼脂糖凝胶，如图4-6所示。待下一次使用时，将待测样品加入上一次未使用的加样孔中，然后进行电泳。由于在两次的电泳过程中，同一块琼脂糖凝胶在电泳槽中的方向是相反的，即第一次电泳时点样了的加样孔靠近负极，样品向着琼脂糖凝胶的中心移动；在第二次电泳时上一次加样的加样孔则靠近正极，因此琼脂糖凝胶中残留的上一次的样品将朝向琼脂糖凝胶外移动，直至上一次的样品移动至琼脂糖凝胶外，使第一次电泳时点样了的加样孔还可以继续在下一次使用。同时，由于琼脂糖凝胶在反复电泳和保存的过程中不易保存，因此本装置还配有储胶容器400，可以使经过凝胶电泳的琼脂糖凝胶或未使用的琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中，达到长期保存的目的。实施例2本实施例提供了一种琼脂糖凝胶电泳方法，使用实施例1提供的用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的琼脂糖凝胶，包括如下步骤：1在第一次配制琼脂糖凝胶时，在凝胶凝固前加入核酸染料按照核酸染料说明书中的比例加入，倒入制胶平台100中，在制胶平台100的两端第一卡槽130中分别插入两个加样梳300，待凝胶冷却凝固后，进行核酸电泳。2在核酸电泳结束摄像后，将其凝胶放于凝胶托盘200中，置于储胶容器400中，在储胶容器400里加入电泳缓冲液，密封后放于4℃冰箱保存，待下次使用。3之后在重复使用时，每次进行核酸电泳时，都在与上次相反的另外一端加样孔中直接加入上样样品，使待检样品从负极向正极移动即可，而上一次实验存在于凝胶中的样品就会从另外一边迁移出凝胶从而避免了对待检样品的影响。每次实验结束后，都将该凝胶放于储胶容器400中加入电泳缓冲液保存于4℃冰箱。电泳结果如图7-A至7-E所示，图7-A至7-E为第一次、第三次、第五次、第六次、第七次重复使用时琼脂糖凝胶的灵敏度，由图中可以看出，本实施例提供的琼脂糖凝胶电泳方法，可以至少重复利用琼脂糖凝胶四次，在第五次重复使用琼脂糖凝胶时，检测灵敏度才降低。实施例3本实施例提供了一种琼脂糖凝胶电泳方法，与实施例2的区别在于：反复使用四次后，因核酸染料存在少量降解，为防止检测灵敏度的降低，在每次检测时将所加入的样品与核酸染料混合后再加入。本实施例以体积百分比浓度为0.08％的核酸染料与上样样品以1：6混合后电泳，如图8-A至8-K所示，可达到最佳的电泳效果与检测灵敏度，可检测到约为0.5ng的DNA含量，本实施例提供的琼脂糖凝胶电泳方法两周内反复使用十二次，其灵敏度与传统现配现用型的琼脂糖凝胶相当。但该琼脂糖凝胶在保存两周或反复使用十二次后，琼脂糖凝胶出现硬度降低，易断裂，检测结果灵敏度降低，拖尾弥散等现象，后期不建议使用。最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

权利要求：1.一种用于制备琼脂糖凝胶的装置，其特征在于，所述装置包括：制胶平台、至少一个凝胶托盘、至少两个加样梳和储胶容器；所述制胶平台设置有至少一个用于放置所述凝胶托盘的凹槽A，所述凹槽A的内侧壁与所述凝胶托盘两侧的凸缘相接触；所述凹槽A的侧壁上设置有用于可拆卸固定两个加样梳的若干第一卡槽；所述两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；所述储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B；所述储胶容器中还设置有贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；所述储胶容器还包括用于密封储胶容器的密封装置；使用时，将凝胶托盘放置于制胶平台的凹槽A中，然后将两个加样梳固定于凹槽A中，待凝胶冷却后取出加样梳；将经过凝胶电泳的琼脂糖凝胶或未使用的琼脂糖凝胶置于凝胶托盘内放入储胶容器，浸没于缓冲液后密封贮存。2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述储胶容器包括储胶盒体和储胶盖体；所述储胶盒体内设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B，所述凹槽B的侧壁低于储胶盒体侧壁。3.根据权利要求2所述的装置，其特征在于，所述储胶盒体内设置有一个凹槽B，凹槽B相对的两个侧壁分别设置有用于放置可拆卸挡板的第二卡槽，可拆卸挡板将凹槽B分割成第二凹槽B和第三凹槽B。4.根据权利要求2或3所述的装置，其特征在于，所述储胶盒体和所述储胶盖体的接触面设置有密封胶条。5.根据权利要求2或3所述的装置，其特征在于，所述储胶盒体和所述储胶盖体可拆卸链接或铰接。6.根据权利要求2所述的装置，其特征在于，所述凹槽B的深度与储胶盒体侧壁的高度比为1：2-5。7.一种琼脂糖凝胶电泳方法，其特征在于，包括：使用权利要求1-6中任一项所述的用于制备琼脂糖凝胶的装置制备琼脂糖凝胶；在琼脂糖凝胶一侧的若干点样孔内加入待测样品然后进行凝胶电泳，将电泳后的琼脂糖凝胶至于所述储胶容器内保存；待下一次使用时将待测样品加入另一侧的若干点样孔内进行凝胶电泳。8.根据权利要求7所述的琼脂糖凝胶电泳方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶使用3-5次后，先将核酸染料与待测样品混合均匀后再加入加样孔。9.根据权利要求8所述的琼脂糖凝胶电泳方法，其特征在于，所述核酸染料与待测样品的体积比为1：5-10；所述核酸染料为体积百分比浓度为0.08％的核酸染料。10.权利要求1-6中任一项所述的用于制备琼脂糖凝胶的装置或权利要求7-9中任一项所述的琼脂糖凝胶电泳方法在核酸检测中的应用。

百度查询： 天康生物制药有限公司 用于制备琼脂糖凝胶的装置、琼脂糖凝胶电泳方法和应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD