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申请/专利权人：吉林大学
申请日：2024-01-23
公开（公告）日：2024-06-04
公开（公告）号：CN118127231A
主分类号：C12Q1/70
分类号：C12Q1/70;C12Q1/6816;C12N15/113;C12N15/55;C12R1/93
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.04#公开
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a系统的HIV‑1病毒pol基因非扩增检测方法，提取待测样品RNA；配制CRISPR‑Cas13a检测体系；CRISPR‑Cas13a检测体系中的引导RNA序列如SEQIDNO.1所示、如SEQIDNO.2所示、如SEQIDNO.3所示或如SEQIDNO.4所示中的任意一条或多条；在检测分析体系中加入待测样品RNA；加入一对检测报告分子和RNA酶抑制剂，实时检测相应荧光值并进行判断，通过检测报告分子被Cas13a蛋白切割产生的荧光强度的稳定变化，能够以非扩增方式短时间、常温条件对HIV‑1病毒进行现场原位快速检测，灵敏度高。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas13a系统的HIV-1病毒pol基因非扩增检测方法，其特征在于，包括如下步骤：提取待测样品RNA；配制CRISPR-Cas13a检测体系，所述CRISPR-Cas13a检测体系中包括Cas13a蛋白和引导RNA，引导RNA中的与靶RNA序列的互补片段如SEQIDNO.1所示、如SEQIDNO.2所示、如SEQIDNO.3所示或如SEQIDNO.4所示，任意一条或多条引导RNA与Cas13a蛋白在室温下孵育15分钟形成复合物；在检测体系中加入待测样品RNA，复合物用检测缓冲液稀释后可与含有靶RNA序列的待测样品RNA结合；加入一对检测报告分子和RNA酶抑制剂，室温下孵育；实时检测相应荧光值，通过荧光信号与阴性样本差异，判断待测样品是否为阳性HIV-1样品。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林大学 一种基于CRISPR-Cas13a系统的HIV-1病毒pol基因非扩增检测方法
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