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申请/专利权人：西湖大学
申请日：2024-04-10
公开（公告）日：2024-06-07
公开（公告）号：CN118147052A
主分类号：C12N5/0735
分类号：C12N5/0735;C12N15/85;C12N15/65;A01K67/0275
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.25#实质审查的生效;2024.06.07#公开
摘要：本发明涉及一种分离、培养鸡原始生殖干细胞并构建基因修饰鸡的方法。在优化培养体系下，体外短期培养可获得百万级别细胞并稳定建系，且能够在体外培养200天以上并维持迁移能力。体外建系的PGCs基因修饰后，通过血管注射方法可以获得基因修饰鸡；同时，注射到鸡胚血管的PGCs在孵化第七天分选出来，在体外再培养后再注射到鸡胚血管中，可以提高构建基因修饰鸡的效率。本发明还涉及到PGCs冷冻，复苏存活率达到80％以上，可以对分离获得或是基因修饰后的PGCs进行长期保存。本发明具有分离、培养效率高的优点，同时两次血管注射的方法可以提高构建基因修饰鸡的效率，本发明在鸡PGCs体外分离、培养、建系、冷冻保种及构建基因修饰鸡等方面具有很好的应用前景。
主权项：1.一种用于鸡原始生殖干细胞培养的PGCs培养基，其特征在于，其组成成份为：基础培养基为KO-DMEM，2％vv鸡血清，20％vv胎牛血清，100×丙酮酸钠，100×GlutaMax，100×NEAA，1×GSnucleosidesupplement，0.1mMβ-巯基乙醇，4ngmlFGF2，6ngmlSCF。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西湖大学 分离、培养鸡原始生殖干细胞并构建基因修饰鸡的方法
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