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申请/专利权人：山西医科大学
申请日：2024-04-02
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN118166037A
主分类号：C12N15/85
分类号：C12N15/85;C12N15/53;C12N15/12;A01K67/0278
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.28#实质审查的生效;2024.06.11#公开
摘要：一种基于Gal4UAS系统的肝脏特异性胰岛素样生长因子结合蛋白7基因过量表达转基因斑马鱼的构建方法，包括：斑马鱼igfbp7基因序列如SEQIDNO.01所示；利用Tol2kit系统提供的中介构建体和Gibsonassembly技术构建转基因目标载体pDestTol2‑4XUAS‑igfbp7‑P2A‑mCherry‑crystallin‑venus和载体pDestTol2‑lfabp10‑Gal4‑cmcl2‑venus；利用Tol2转座方法，将2个载体分别与Tol2mRNA导入单细胞期的斑马鱼胚胎中，荧光筛选稳定遗传的后代，获得2种稳定遗传转基因品系斑马鱼；将成年的2种稳定转基因品系斑马鱼交配，荧光筛选稳定遗传的眼睛和心脏同时表达绿色荧光的后代，即获得可稳定遗传的肝脏特异性过量表达Igfbp7转基因斑马鱼。本发明通过Gal4UAS双元系统在斑马鱼体内实现特定基因在特定组织的过量表达，对于研究特定基因在特定组织的功能和作用提供过表达模型。
主权项：1.一种基于Gal4UAS系统的肝脏特异性胰岛素样生长因子结合蛋白7基因过量表达转基因斑马鱼的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：斑马鱼igfbp7基因序列如SEQIDNO.01所示；步骤2：利用Tol2kit系统提供的中介构建体和Gibsonassembly技术构建转基因目标载体pDestTol2-4XUAS-igfbp7-P2A-mCherry-crystallin-venus和载体pDestTol2-lfabp10-Gal4-cmcl2-venus；步骤3：利用Tol2转座方法，将步骤2得到的2个载体分别与Tol2mRNA导入单细胞期的斑马鱼胚胎中，荧光筛选稳定遗传的后代，获得2种稳定遗传转基因品系斑马鱼；步骤4：将成年的2种稳定转基因品系斑马鱼交配，荧光筛选稳定遗传的眼睛和心脏同时表达绿色荧光的后代，即获得可稳定遗传的肝脏特异性过量表达Igfbp7转基因斑马鱼。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 山西医科大学 基于Gal4/UAS系统的肝脏特异性胰岛素样生长因子结合蛋白7基因过量表达转基因斑马鱼的构建方法及应用
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