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申请/专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司
摘要：本发明提供了一种钩状探针、核酸连接方法以及测序文库的构建方法，所述钩状探针包括目标特定区域和相连的钩区域，所述目标特定区域包括与待连接的核酸片段的至少部分单链互补配对的序列，所述钩区域包括与所述核酸片段不配对的序列，所述钩区域的末端是可连接末端，所述可连接末端能够连接到所述核酸片段的单链末端。
主权项：1.一种核酸测序文库的构建方法，其特征在于，所述方法包括：使钩状探针与变性的待连接的核酸片段退火杂交；所述钩状探针包括目标特定区域和相连的钩区域，所述目标特定区域包括与待连接的核酸片段的至少部分单链互补配对的序列，所述钩区域包括与所述核酸片段不配对的序列，所述钩区域的末端是可连接末端，所述可连接末端能够连接到所述核酸片段的单链末端；所述钩状探针是3'钩状探针，所述3'钩状探针具有结构5'-（钩区域）-（目标特定区域）-3'，所述3'钩状探针的钩区域5'末端具有能够连接到所述核酸片段的3'末端的功能性5'磷酸基团，所述3'钩状探针的钩区域包括通用引物结合位点；在连接酶的存在下，使所述3'钩状探针的功能性5'磷酸基团与所述核酸片段的3'末端连接；在聚合酶的存在下，以所述3'钩状探针的3'端为聚合酶反应起点进行延伸反应；使用单链外切酶消化所述线性非特异性连接产物、多余的核酸片段以及多余的钩状探针；在所述延伸反应的产物5'端连接5'接头；和使用与所述5'接头和所述3'钩状探针的钩区域序列全部或部分互补的引物序列进行PCR扩增；对PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，确认PCR扩增产物。
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权利要求：
百度查询： 深圳华大智造科技股份有限公司 钩状探针、核酸连接方法以及测序文库的构建方法
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