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抗感两种魔芋材料不同Pcc侵染阶段基因表达谱构建方法 

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申请/专利权人:昆明学院

摘要:本发明属于基因表达谱构建技术领域,公开了一种抗感两种魔芋材料不同Pcc侵染阶段基因表达谱构建方法,所述抗感两种魔芋材料不同Pcc侵染阶段基因表达谱构建方法包括Pcc接种魔芋与样本采集;魔芋总RNA的提取、cDNA文库构建与质检测序;进行测序数据质控与参考序列比对分析、基因表达量分析和样本关系分析、差异表达基因筛选与富集分析和加权共表达网络分析。由此表明MAPK信号转导在A.muelleri免疫反应的激活方面具有重要作用。此外,JA信号通路也同时参与了两种魔芋对软腐病的防御反应,外源MeJA预处理试验证实,其可以减轻魔芋球茎软腐病的发病程度,MeJA预处理的病情指数较对照降低约13.75%。

主权项:1.一种抗感两种魔芋材料不同Pcc侵染阶段基因表达谱构建方法,其特征在于,包括以下步骤:第一步,Pcc接种魔芋与样本采集,选择在温室生长5个月后的生长状态良好且完全健康的A.konjac和A.muelleri植株,将100μL的Pcc菌液1×108CFUmL接种于叶柄基部1-2cm处,同时接种等量的无菌水作为对照;第二步,魔芋总RNA的提取、cDNA文库构建与质检测序,参照Reagent试剂盒步骤提取魔芋根和叶柄组织中的总RNA,用NanoDrop2000对所提的RNA的纯度和浓度进行检测,用琼脂糖凝胶电泳检测RNA的质量,用Agilent5300生物分析仪检测RNA的完整性,提取出的RNA一部分用于转录组测序;第三步,进行测序数据质控与参考序列比对分析、基因表达量分析和样本关系分析、差异表达基因筛选与富集分析和加权共表达网络分析。

全文数据:

权利要求:

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