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用于确定登革病毒的滴度的免疫灶斑测定 

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申请/专利权人:武田疫苗股份有限公司

摘要:本发明提供用于确定登革病毒的病毒滴度的改进的免疫灶斑测定,以及所述测定在基于减毒活登革病毒的疫苗的质量控制中或在来自感染登革的个体的血液样品的诊断中的用途。

主权项:1.一种用于确定含登革病毒的样品中的登革病毒血清型的滴度的方法,所述方法包括以下步骤:a将来自登革易感性细胞系的细胞接种于测定板中并培养所述细胞一段培养期;b制备所述含登革病毒的样品的连续稀释液;c将连续稀释的样品添加到步骤a中接种和培养的细胞中,并在第一孵育期内孵育所述细胞;d将覆盖介质提供于步骤c中孵育的细胞,其中所述覆盖介质包含i微晶纤维素和ii羧甲基纤维素或其盐,并在第二孵育期内将所述细胞与所述覆盖介质一起孵育;e将所述孵育的细胞固定;f1使用登革病毒血清型特异性抗体作为第一抗体以及第二抗体对所述孵育的细胞进行免疫染色,所述第二抗体对所述第一抗体具有特异性并与能够将底物转化为可见染料的酶缀合或与可检测标记缀合;或f2使用与可检测标记缀合的登革病毒血清型特异性抗体作为第一抗体对所述孵育的细胞进行免疫染色;以及g通过对所述测定板的每个孔中灶斑的数量计数来确定每种登革病毒血清型的滴度。

全文数据:

权利要求:

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