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冬虫夏草糖原含量检测方法和结构检测方法 

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申请/专利权人:广东省人民医院

摘要:本发明公开了一种冬虫夏草糖原含量检测方法和结构检测方法,特别是提供了一种冬虫夏草糖原提取纯化方法,其包括如下步骤:取冬虫夏草菌体破碎后进行第一次超高速离心,得到粗提取冬虫夏草糖原;然后使用70%~80%蔗糖溶液和35%~40%蔗糖溶液进行蔗糖梯度纯化,再进行第二次超高速离心得到冬虫夏草糖原。本发明使用温和、无损的超高速蔗糖梯度离心法糖原提取技术,将新鲜的冬虫夏草中的糖原成分提取纯化,克服以往技术的对糖原结构破坏的缺点。本发明还提供了糖原结构分析流程、分析糖原粒子的链长分布、使用透射电镜观察糖原颗粒的形态,为新鲜的冬虫夏草的药用价值研究提供了基础。

主权项:1.一种冬虫夏草糖原提取纯化方法,其特征在于包括如下步骤:(1)冬虫夏草糖原粗提取:取冬虫夏草菌体,破碎后置于糖原提取缓冲液中,超声破碎得到冬虫夏草匀浆,取匀浆液第一次离心,然后取上清液进行第一次超高速离心,第一次超高速离心时采用的离心力为300000~400000g;除去上清液,沉淀重悬于糖原提取缓冲液中得到重悬液;(2)冬虫夏草糖原的纯化:取离心管,在底部加入70%~80%蔗糖溶液,再加入35%~40%蔗糖溶液;将步骤(1)得到的重悬液加入蔗糖梯度,然后进行第二次超高速离心,第二次超高速离心时采用的离心力为300000~400000g;离心后弃去上清液,用超纯水将糖原溶解,再用无水乙醇沉淀糖原,随后进行第二次离心,得到的沉淀物即为冬虫夏草糖原。

全文数据:

权利要求:

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