申请/专利权人：中交和美环境生态建设有限公司

申请日：2021-10-14

公开（公告）日：2024-06-14

公开（公告）号：CN113801824B

主分类号：C12N1/20

分类号：C12N1/20;C12N1/36;C12N11/10;C12N11/084;C12N11/04;C02F3/02;C02F3/32;C02F3/34;C12R1/38

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.14#授权;2022.01.04#实质审查的生效;2021.12.17#公开

摘要：本发明公开了一种具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1及其包埋小球与应用，该具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1分类命名为假单胞菌Y1，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，保藏地点为中国武汉大学，保藏日期：2021年09月01日，保藏编号为：CCTCCNO：M20211119。本发明将从污水厂曝气池活性污泥中筛选出来的假单胞菌Y1通过贫营养驯化并经过包埋固定化，联合挺水植物的方法，可以有效处理贫营养低化学需氧量的微污染水体，由于微生物被包埋固定化，所以没有剩余污泥产生，大大减少处理成本。本发明可以在低化学需氧量与不使用物化方法以及活性污泥的条件下脱除景观水体中的氮，达到地表水Ⅳ类及以上水体的标准。

主权项：1.一种具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1包埋小球，其特征在于：含有具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1；所述具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1的分类命名为假单胞菌Y1Pseudomonassp.Y1，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，保藏地点为中国武汉大学，保藏日期：2021年09月01日，保藏编号为：CCTCCNO：M20211119；所述具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1包埋小球由如下方法制备而得：1将具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1接种至异养硝化好氧反硝化培养基中，培养基配方为硫酸铵0.24g，丁二酸钠4.052g，磷酸氢二钾0.25g，氯化钠0.125g，七水合硫酸镁0.125g，四水合硫酸锰0.0025g，在24-32℃，摇床转速130-160rpm振荡培养48-72h；2随后培养液中硫酸铵与丁二酸钠浓度每3天按初始浓度的20％递减，直至第15d各营养物浓度仅为初始浓度的20％时，不再改变营养物浓度，同时在驯化过程中间歇曝气，确保溶解氧控制4-6mgL，保证在好氧条件下培养；在这种贫营养及好氧环境条件下对目的菌群进行长期驯化，整个驯化富集过程持续1个月，此为驯化后具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1；3将2所述Y1菌接种至培养基中，在72h时测定细菌生长密度OD600，当OD600为0.7的对数生长期时进行包埋固定化；4取菌液30mL，经5000rmin，5min离心后再取10mL与含100mL最佳固定化混合溶液冷却后搅拌均匀，得到的具有高效异养硝化好氧反硝化功能的假单胞菌Y1包埋小球；其中，最佳固定化混合溶液的包埋固定化方法为：称取9.0g聚乙烯醇与1.0g海藻酸钠、1.0g壳聚糖与2.0g环糊精溶于100mL蒸馏水中，于90℃水浴搅拌加热2个小时使其部分溶解，形成混合液，并置于超声波清洗仪中进行超声处理，使其完全彻底溶解，并于121℃下灭菌20分钟，取出冷却后加入菌液，随后将混合液用造粒装置打入加入了4g无水氯化钙的100mL饱和硼酸溶液中，加入氯化钙前用氢氧化钠滴定使pH达到7，使其形成小球，在4℃冰箱中交联24h后滤出，经生理盐水洗涤3次后即可。

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