申请/专利权人：绵阳市第三人民医院

申请日：2023-12-21

公开（公告）日：2024-06-21

公开（公告）号：CN118222676A

主分类号：C12Q1/6816

分类号：C12Q1/6816

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.21#公开

摘要：本发明基于十字型DNA和UiO‑66Zr金属有机框架材料，开发了一种用于氯霉素检测的催化发夹自组装扩增方法。金属有机框架材料用于猝灭荧光信号。利用四个荧光基团的十字型DNA来提高灵敏度。十字型的DNA纳米结构被吸附到UiO‑66Zr金属有机框架材料的表面，只剩微弱的荧光信号。氯霉素可以与H‑apt的适体序列结合，并打开其发夹结构。然后，打开的发卡H‑apt触发了发卡H1和发卡H2之间的催化发卡自组装反应。之后，催化发卡自组装产物与十字型DNA纳米结构杂交，使其从金属有机框架材料表面离开，并显著恢复荧光信号。氯霉素的浓度通过荧光强度进行定量测定。本发明的检测限低至0.87pM。由于UiO‑66Zr金属有机框架材料的高荧光猝灭效率和催化发卡自组装的高扩增能力，本发明具有高灵敏度。此外，本发明已成功应用于实际样品的检测，在食品安全氯霉素监测中显示出巨大的适用性和潜力。

主权项：1.一种基于十字型DNA和UiO-66Zr金属有机框架材料的催化发夹自组装扩增检测氯霉素的方法，包括如下步骤：1将待测氯霉素样品与发卡H-apt、发卡H1和发卡H2在Tris-HCl缓冲液中混合，其中发卡H-apt序列为5’-ACGACTTCAGTGAGTTGTCCCACGGTCGGCGAGTCGGTGGTAGCGACATCACCTAGCCCACCG-3’，发卡H1序列为5’-CGGTGGGCTAGGTGATGTCGTAGTGTGTAGACGACATCACCTAGCCCTTGTCATAGACAC-3’，发卡H2序列为5’-GATGTCGTCTACACACTACGACATCACCTAGCTAGTGTGTAGA-3’。2将序列S1、S2、S3和S4以相同的摩尔比在Tris-HCl缓冲溶液混合孵育形成十字型DNA，然后将十字型DNA与UiO-66Zr金属有机框架材料混合，其中S1序列为5’-FAM-GTGTCTATGACAAGGAAAAAAAAAATTCGAAACTTCGAAACTTCGAAACGTATCCAAGTATCCAAGTATCCAAAAAAAAAAAATCTACACACT-3’，S2序列为5’-FAM-GTGTCTATGACAAGGAAAAAAAAAAACTTACGAACTTACGAACTTACGAGTTTCGAAGTTTCGAAGTTTCGAAAAAAAAAAAATCTACACACT-3’，S3序列为5’-FAM-GTGTCTATGACAAGGAAAAAAAAAATTGGATACTTGGATACTTGGATACCAAAGCTTCAAAGCTTCAAAGCTTAAAAAAAAAATCTACACACT-3’，S4序列为5’-FAM-GTGTCTATGACAAGGAAAAAAAAAAAAGCTTTGAAGCTTTGAAGCTTTGTCGTAAGTTCGTAAGTTCGTAAGTAAAAAAAAAATCTACACACT-3’。3将步骤2与步骤3所得的溶液混合，检测所得的混合溶液荧光强度，用标准曲线法得出待测氯霉素样品中氯霉素浓度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 绵阳市第三人民医院 一种基于十字型DNA和UiO-66（Zr）金属有机框架材料的催化发夹自组装扩增检测氯霉素的方法

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