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申请/专利权人：云锦华彰(珠海)生物科技有限公司;云锦华彰(北京)生物科技有限公司
申请日：2024-03-08
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118240810A
主分类号：C12N9/88
分类号：C12N9/88;C12N15/81
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明涉及一种表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明的表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母的构建方法包括以下步骤：对碳酸酐酶的编码序列进行密码子优化并以此为模板进行PCR扩增，得到碳酸酐酶的PCR产物；通过同源重组技术将上述碳酸酐酶的PCR产物连接至pGAPZaA载体上，得到带有碳酸酐酶的pGAPZaA‑CA载体；将上述带有pGAPZaA‑CA载体转入毕赤酵母中，得到表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母。本发明通过构建pGAPZaA‑CA载体并转入毕赤酵母中，得到表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母，其所分泌的碳酸酐酶的活力优异，摇瓶发酵得到的碳酸酐酶活力最高可达568.43UmL。
主权项：1.一种表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、对碳酸酐酶的编码序列进行密码子优化，得到优化后的碳酸酐酶序列；S2、以步骤S1所得碳酸酐酶序列为模板进行PCR扩增，得到碳酸酐酶的PCR产物；S3、通过同源重组技术将步骤S2所得碳酸酐酶的PCR产物连接至pGAPZaA载体上，得到带有碳酸酐酶的pGAPZaA-CA载体；S4、将步骤S3所得带有pGAPZaA-CA载体转入毕赤酵母中，得到表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 云锦华彰(珠海)生物科技有限公司;云锦华彰(北京)生物科技有限公司 一种表达碳酸酐酶的重组毕赤酵母及其构建方法与应用
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