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申请/专利权人：上海芙普瑞生物科技有限公司
申请日：2024-03-20
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118240745A
主分类号：C12N5/071
分类号：C12N5/071
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明公开了一种外泌体的提取制备方法，包括以下方法：步骤S1：获取干细胞培养液上清；步骤S2：加入海藻糖和醋酸盐缓冲液以制备提取液。本发明提取方法采用的是超高速离心法，为了减小微囊泡和脂蛋白影响最后的超高速离心，先采取用0.1M的醋酸盐溶液先一步滴定，而醋酸盐溶液在pH为4.75±0.01时沉淀外泌体的效果最好；蛋白质在酸性环境下会有一定的损伤，所以在添加醋酸盐溶液调整pH之前先加海藻糖溶液，醋酸盐溶液进过一轮离心沉淀后，降低培养液上清体积10倍，随后通过超高速离心机100000g离心70min。该方法超高速心时有海藻糖保护外泌体，会降低外泌体破损，且该方法不需要二次超高速离心，提取试剂价格低廉易获取。
主权项：1.一种外泌体的提取制备方法，其特征在于；包括以下方法：步骤S1：获取干细胞培养液上清；步骤S2：加入海藻糖和醋酸盐缓冲液以制备提取液；步骤S3：将步骤S2中的混合液进行离心处理，得到外泌体浓缩液；步骤S4：将步骤S3中的外泌体浓缩液进行超高速离心，得到外泌体沉淀；步骤S5：将外泌体沉淀进行混合和过滤，以得到外泌体悬液。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海芙普瑞生物科技有限公司 一种外泌体的提取制备方法
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