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一种基于CRISPR/Cas12b-LAMP的离心式微流控一体化的肺炎支原体检测试剂盒及其应用 

申请/专利权人:上海市重大传染病和生物安全研究院

申请日:2024-04-22

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN118240954A

主分类号:C12Q1/689

分类号:C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;B01L3/00;C12R1/35

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.25#公开

摘要:本发明公开了一种基于CRISPRCas12b‑LAMP的离心式微流控一体化的肺炎支原体检测试剂盒及其应用,试剂盒包括检测用组合物和预包埋试剂的离心式微流控芯片;检测用组合物包括针对肺炎支原体MP5设计的LAMP扩增引物、靶向肺炎支原体MP5基因的sgRNA、AapCas12b蛋白、荧光探针、Bst2.0聚合酶、dNTP试剂和混合缓冲液;LAMP扩增引物F3、B3、FIP、BIP、FLP、BLP的核苷酸序列如SEQIDNO.1‑6所示;sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。本发明的试剂盒,基于CRISPRCas12b系统结合LAMP等温扩增,通过实时荧光检测与离心式微流控芯片技术相结合的方法,实现肺炎支原体的一步法自动化检测,检测时间短、具有良好的灵敏度和特异性,并通过大量临床样本验证了方法在临床应用中的可行性,为临床肺炎支原体感染的高效检测奠定了基础。

主权项:1.一种基于CRISPRCas12b-LAMP的离心式微流控一体化的肺炎支原体检测试剂盒,其特征在于,包括检测用组合物,以及预包埋试剂的离心式微流控芯片;所述检测用组合物包括针对肺炎支原体MP5设计的LAMP扩增引物、靶向肺炎支原体MP5基因的sgRNA、AapCas12b蛋白、荧光探针、Bst2.0聚合酶、dNTP试剂和混合缓冲液;所述LAMP扩增引物F3、B3、FIP、BIP、FLP、BLP的核苷酸序列如SEQIDNO.1-6所示;所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海市重大传染病和生物安全研究院 一种基于CRISPR/Cas12b-LAMP的离心式微流控一体化的肺炎支原体检测试剂盒及其应用

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