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一种同时检测cTnI/NT-proBNP/D-Dimer的量子点试纸条及制备方法 

申请/专利权人:江苏大学

申请日:2022-12-22

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN118243916A

主分类号:G01N33/543

分类号:G01N33/543;G01N33/533;G01N33/68;G01N21/64

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.25#公开

摘要:本发明属于生物标志物诊断技术领域,涉及一种同时检测急性心肌梗死的三种标志物的量子点免疫层析试纸条。以荧光量子点为荧光探针,分别偶联标记心肌肌钙蛋白IcTnI、N末端脑钠尿肽原和NT‑proBNPD‑二聚体D‑Dimer三种急性心肌梗死标志物,并将cTnI、NT‑proBNP、D‑Dimer、羊抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜上,采用免疫层析双抗夹心法原理,利用特异性抗体的特异性结合同时检测三种标志物。本发明制备的试纸条检测样品体积小,检测时间短,具有良好的检测性能,线性范围宽,准确性和精密度好,无交叉反应。cTnI、NT‑proBNP和D‑Dimer联合检测的成功,为急性心肌梗死AMI提供了早期诊断的试纸,扩大了AMI的诊断窗口,具有成本低、使用方便等优点。

主权项:1.一种同时检测cTnINT-proBNPD-Dimer的量子点试纸条及制备方法,其特征在于,所述的试纸条包括以下步骤:1制备量子点:取65-80mg的梳状两亲性聚合物,分散在6-12mL的DMSO中,室温条件下磁力搅拌充分分散。然后加入0.5-1mL的油溶性CdSeZnS量子点溶液,室温条件下磁力搅拌充分分散。然后引入氮气流,充分鼓泡8-15分钟,在持续氮气流的保护下,先升温到110℃,保温15-20分钟,再接着升温到180℃,保温10~20分钟。然后冷却到室温,所剩液体透析除去DMSO,得到改性的量子点水溶液;2制备量子点和抗体的偶联复合物:取5-12μL自制水溶性量子点置于离心管中,加入50-100μL磷酸盐缓冲液,混匀后,加入偶联剂EDC和NHS进行活化,然后分别加入相应的cTnI、NT-proBNP、D-Dimer抗体,并将其置于水浴恒温振荡器中震荡2-4h,反应结束后加入10%BSA进行封闭,离心并除去上清液,加入保存液进行超声重悬,静置过夜,4℃保存备用;3包被试纸条:将cTnI、NT-proBNP、D-Dimer、羊抗鼠IgG抗体按顺序包被在硝酸纤维素膜上形成T1检测线、T2检测线、T3检测线、C质控线;4制备试纸条取底板1,将样品垫2、结合垫3、硝酸纤维素膜4和吸水垫5自前向后依次粘贴于底板上,结合垫2覆盖硝酸纤维膜4的前部,样品垫1压住结合垫的一部分,吸水纸5覆盖硝酸纤维素膜4的后部,切割成长条,制得cTnI、NT-proBNP、D-Dimer三联量子点免疫层析试纸条。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 江苏大学 一种同时检测cTnI/NT-proBNP/D-Dimer的量子点试纸条及制备方法

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