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利用γ-聚谷氨酸发酵液提取纯化γ-聚谷氨酸的方法 

申请/专利权人:成都金开生物工程有限公司

申请日:2024-05-22

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN118240201A

主分类号:C08G69/10

分类号:C08G69/10;C12P13/02;C12N1/20;C12R1/125

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.25#公开

摘要:本发明公开了利用γ‑聚谷氨酸发酵液提取纯化γ‑聚谷氨酸的方法,属于γ‑聚谷氨酸生产技术领域,所述包括以下步骤:利用枯草芽孢杆菌发酵培养得原发酵液,原发酵液经杀菌后调节至酸性,再经搅拌、离心,收集上清液,再向上清液中加入脱色树脂、活性炭和硅藻土,振荡10h,再过滤,得到脱色滤液,脱色滤液再经超滤、浓缩后,得到浓缩液,向浓缩液中搅拌加入沉淀剂,搅拌、静置、离心、干燥后,得到γ‑聚谷氨酸粗品;将γ‑聚谷氨酸粗品经磁选载体磁选纯化,得到γ‑聚谷氨酸。本发明通过综合膜分离、化学沉淀法分离和磁选纯化的方式,经检测,经本发明方法纯化的γ‑聚谷氨酸的纯度为99.3%‑99.7%,纯度表现优异,具有推广价值。

主权项:1.利用γ-聚谷氨酸发酵液提取纯化γ-聚谷氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、利用枯草芽孢杆菌发酵培养得原发酵液,调节原发酵液的黏度,再升温至80-100℃,恒温搅拌后冷却,再调节pH至3.0-3.2,搅拌、离心,收集上清液,再向上清液中加入脱色树脂、活性炭和硅藻土,振荡10h,再过滤,得到脱色滤液,脱色滤液再经超滤膜超滤处理,收集截留液;S2、将截留液浓缩至原体积10%-20%,得到浓缩液,向浓缩液中搅拌加入沉淀剂,搅拌、静置、离心、干燥后,得到γ-聚谷氨酸粗品;S3、将γ-聚谷氨酸粗品置于纯水中,调节pH至9.5-10.0,向其中搅拌加入磁选载体,再经外加磁场分离,得到γ-聚谷氨酸-磁选复合载体,将γ-聚谷氨酸-磁选复合载体置于质量分数为0.5%的乙酸中,搅拌2-3h,再利用纯水洗涤γ-聚谷氨酸,得到纯品,纯品再经真空脱水后,得到γ-聚谷氨酸;所述磁选载体的制备过程如下:A1、向纯水中搅拌加入纳米四氧化三铁,在氮气保护、80℃条件下加入油酸,搅拌反应30-40min后,降温至45-50℃,再向其中搅拌加入PEG-6000,超声搅拌20-30min,搅拌完毕后,冷却至室温,得到磁性载体;A2、向纯水中搅拌加入无水乙醇和γ-聚谷氨酸,搅拌混合30min,再向其中搅拌加入甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯和磁性载体,超声搅拌20-30min,搅拌完毕后,得到预聚体;A3、向无水乙醇中加入聚乙烯吡咯烷酮,搅拌至固体完全溶解,充入氮气并升温至60-65℃,向其中搅拌加入偶氮二异丁腈和预聚体,60-65℃恒温、氮气保护下,搅拌反应24h,反应完毕后,冷却至室温,用外加磁场分离固体组分,按顺序用质量分数为0.5%的乙酸和纯水先后冲洗固体组分,然后将洗净后的固体组分置于60℃条件下干燥至恒重,冷却至室温,得到磁选载体。

全文数据:

权利要求:

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