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申请/专利权人：浙大宁波理工学院
申请日：2022-11-11
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN116254253B
主分类号：C12N9/88
分类号：C12N9/88;C12N15/60;C12P13/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2023.06.30#实质审查的生效;2023.06.13#公开
摘要：本发明公开了一种通过DNA合成改组获得的热稳定性得到显著提升的谷氨酸脱羧酶突变酶及应用。该突变酶筛选自通过DNA合成改组构建的突变文库，该突变文库由已知可以提高谷氨酸脱羧酶热稳定性和催化活性的突变位点即正向突变的随机组合体构成。通过对该特别文库的初筛和复筛，获得了热稳定性和催化活性都优于野生型酶的突变酶D54A‑H181K‑D203E‑S325A：该突变酶的半失活温度为71.23℃，较野生型酶62.04℃提高了9.19℃；催化效率较野生型酶提高了59.5％。该突变酶在催化底物生成γ‑氨基丁酸的过程中具有更好的热稳定性和催化效率，有助于γ‑氨基丁酸及其衍生物的大规模生物制备。
主权项：1.一种通过DNA合成改组组合突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于，由来自短乳杆菌Lactobacillusbrevis的野生型谷氨酸脱羧酶通过引入多位点突变而得，野生型谷氨酸脱羧酶氨基酸序列如SEQIDNO.4所示，所述谷氨酸脱羧酶突变体的突变位点为：D54A-H181K-D203E-S325A。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙大宁波理工学院 一种通过DNA合成改组组合突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体及应用
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