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申请/专利权人:逸惟生物科技(北京)有限公司
摘要:本发明涉及生物工程领域,尤其涉及工程化外泌体基因工程细胞系的制备方法。本发明提供了促进外泌体合成增效的基因编辑供体载体,包括:启动子、转录增强元件和多顺反子基因;所述多顺反子基因包含STEAP3基因、T2A调控序列、SDC‑4基因、P2A调控序列、HsNadB基因、IRES调控序列和红色荧光蛋白标签编码序列。本发明在永生化的MSC细胞系的基础上,将外泌体生物合成和分泌路径中的多个增效基因,以多顺反子方式通过基因编辑插入细胞基因组的安全港位点,实现了外源增效基因在MSC细胞中长期稳定的基因表达,最终得到可以显著提升外泌体产量的MSC基因工程细胞系。
主权项:1.促进外泌体合成增效的基因编辑供体载体,其特征在于,包括:启动子、转录增强元件和多顺反子基因;所述多顺反子基因包含STEAP3基因、T2A调控序列、SDC-4基因、P2A调控序列、HsNadB基因、IRES调控序列和红色荧光蛋白标签编码序列。
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