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申请/专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日：2024-04-02
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN117965815B
主分类号：C12Q1/70
分类号：C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.25#授权;2024.05.21#实质审查的生效;2024.05.03#公开
摘要：本申请公开了基于RPA‑CRISPRCas13a的猴痘病毒核酸检测方法，属于核酸检测技术领域。本申请要解决的技术问题是：如何快速准确的检测或鉴定猴痘病毒。为此本申请提供一种检测猴痘病毒的方法，所述方法包括待测样本中快速裂解的核酸与RPA‑CRISPRCas13a检测组合物混合获得RPA‑CRISPRCas13a检测体系，孵育后进行检测，根据检测结果确定待测样本是否含有猴痘病毒。本申请提供的方法无需借助复杂仪器设备，操作简易，可实现在15分钟内检出低至0.5拷贝微升猴痘病毒样本，为猴痘病毒的现场快速高灵敏检测提供有力技术支撑。
主权项：1.一种检测猴痘病毒的非疾病诊断和或治疗目的的方法，其特征在于，所述方法包括：S1）将待测样本与病毒裂解试剂混合，获得裂解样本；S2）将裂解样本与RPA-CRISPRCas13a检测组合物混合获得RPA-CRISPRCas13a检测体系，孵育后进行检测，根据检测结果确定待测样本是否含有猴痘病毒；所述RPA-CRISPRCas13a检测组合物是包括核酸组合物的物质，所述核酸组合物由特异扩增猴痘病毒特异DNA片段的引物对和crRNA组成，所述引物对由RPA上游引物和RPA下游引物组成，所述RPA上游引物为核苷酸序列是SEQIDNo.1的单链DNA分子；所述RPA下游引物为核苷酸序列是SEQIDNo.2的单链DNA分子；所述crRNA包括靶向猴痘病毒基因的靶向区段，所述靶向区段的核苷酸序列是SEQIDNo.3第37-64位；所述RPA-CRISPRCas13a检测组合物还包括LwaCas13a蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 基于RPA-CRISPR/Cas13a的猴痘病毒核酸检测方法
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