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检测谷子抗除草剂基因紧密连锁的分子标记的方法 

申请/专利权人:重庆大学

申请日:2023-03-14

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN116287130B

主分类号:C12Q1/6816

分类号:C12Q1/6816;C12Q1/6895

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2023.07.11#实质审查的生效;2023.06.23#公开

摘要:本发明提供了一种检测谷子抗除草剂基因紧密连锁的分子标记的方法,所述方法包括利用gRNA、Cas蛋白和单链核酸检测器进行检测的步骤;本发明通过对分子标记的筛选以及gRNA的筛选和优化,提高了检测效率,具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种检测谷子抗咪唑乙烟酸除草剂基因紧密连锁的分子标记的方法,所述方法包括将待测核酸与Cas12i蛋白、gRNA和单链核酸检测器接触;所述gRNA包括与Cas12i蛋白结合的区域和与靶核酸杂交的导向序列,所述与靶核酸杂交的导向序列如SEQIDNo.4所示;检测由Cas蛋白切割单链核酸检测器产生的检测信号,从而检测谷子抗咪唑乙烟酸除草剂基因紧密连锁的分子标记;所述谷子抗咪唑乙烟酸除草剂基因紧密连锁的分子标记为SV9,所述分子标记SV9的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示;所述Cas12i蛋白的氨基酸序列与SEQIDNo.2相比,在对应于SEQIDNo.2所示的氨基酸序列的第790位氨基酸存在突变,所述第790位氨基酸突变为R。

全文数据:

权利要求:

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