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一种低成本的制备大动物眼球切片的方法 

申请/专利权人:上海科锐克医药科技有限公司

申请日:2024-04-03

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118258671A

主分类号:G01N1/36

分类号:G01N1/36;G01N1/28;G01N1/34;G01N1/30

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明公开一种低成本的制备大动物眼球切片的方法,包括:眼底照采集、标记、摘取、固定、定位、脱水透明、浸蜡包埋和切片,其中,通过标记、定位和切除等步骤,将大动物眼球的眼球角膜组织和外侧眼组织进行切除,结合眼底彩照,可以定位到视网膜下注射的部位,本方法结合了视网膜下注射的技术特点与大动物眼球的结构特点,准确地定位到注射部位,切除了其他眼组织部分,克服了现有技术中脱水固定后难以确定注射部位的技术难题,降低了固定、脱水、透明和包埋的操作难度,有利于切片的制备,易于操作且准确性高,节省了人力和经济成本,满足了眼科研发技术的需求,能为眼科新药物的研发提供支持与便利。

主权项:1.一种低成本的制备大动物眼球切片的方法,其特征在于,所述大动物为实验大动物,所述方法包括以下步骤:步骤1、眼底照采集:对经过视网膜下注射后的大动物进行眼底彩照的采集;步骤2、标记:对大动物尸体进行眼球摘取前,在眼球的鼻侧位置进行标记;步骤3、摘取:摘取大动物眼球并保留3-8mm视神经,使用生理盐水冲洗除去血污;步骤4、固定:抽取大动物眼球玻璃体0.4-0.6mL,再立即向玻璃体腔注入等量的戴维森固定液,之后将大动物眼球置于戴维森固定液中进行固定,最后再转移至甲醛中进行固定;步骤5、定位:切去眼球前部角膜组织,通过剪开的角膜可以看到眼球壁的血管分布,然后结合步骤1所得的眼底彩照,观察注射区域在典型血管的位置,去确定注射部位,找到步骤2中的标记,在标记所在位置切口,记为第一切口;以标记所在位置为鼻侧,定位到颞侧,再根据颞侧找到背侧,在背侧所在位置切口,记为第二切口;之后切除外侧眼组织,最后冲洗切割后的大动物眼球,并以切面作为包埋面;步骤6、脱水透明:将步骤5得到的大动物眼球置于10%中性福尔马林固定液中1-2h,再放入去离子水中5-10min;之后依次使用75%乙醇溶液、85%乙醇溶液、95%乙醇溶液和无水乙醇对大动物眼球进行脱水,每次脱水时间为0.5-1.5h;再使用二甲苯对大动物眼球透明处理3次,每次透明时间为30-40min;步骤7、浸蜡包埋:对步骤4得到的包埋面进行石蜡包埋处理,分别浸蜡三次,每次浸蜡时间为1-1.5h,之后进行石蜡包埋;步骤8、切片:对完成包埋后的大动物眼球按照设定厚度参数进行切片。

全文数据:

权利要求:

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