申请/专利权人：北京数字天眼生物科技有限公司

申请日：2024-04-10

公开（公告）日：2024-06-28

公开（公告）号：CN118258802A

主分类号：G01N21/65

分类号：G01N21/65

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.28#公开

摘要：本发明公开了一种定性定量病原微生物的快速检测方法，包括以下步骤：S1、制备4‑巯基苯基乙酸乙醇聚合物纳米粒子基底液，S2、制备已知细菌数量的标准菌液；S3、获取待检测细菌浓度与拉曼信号强度的标准曲线；S4、细菌种类和浓度检测。本发明通过聚合的方法合成4‑巯基苯基乙酸乙醇聚合物纳米粒子，并结合细菌可以有效降低4‑巯基苯基乙酸乙醇聚合物纳米粒子的拉曼信号，实现对空气中细菌的快速检测。

主权项：1.一种定性定量病原微生物的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备4-巯基苯基乙酸乙醇聚合物纳米粒子基底液，具体步骤如下：S1.1、制备10-4molL4-巯基苯基乙酸乙醇溶液；S1.2、制备1％氯金酸溶液；S1.3、制备38.8mmolL柠檬酸三钠水溶液；S1.4、制备纳米探针；S1.5、4-巯基苯基乙酸的修饰；S2、制备已知细菌数量的标准菌液，具体步骤如下：S2.1、菌种来源；S2.2、菌种活化；S2.3、菌种扩大培养；S2.4、测定每种菌液的OD值；S2.5、根据OD值平均值得出目标菌液中菌含量；S2.6、菌液稀释；S3、获取待检测细菌浓度与拉曼信号强度的标准曲线，具体步骤如下：S3.1、将100uL不同浓度的细菌分别与100uL纳米金探针在37℃下振荡孵育15min，再加入10uL浓度为1M的NaCl，涡旋30s之后，完成制备；S3.2、混合后进行拉曼检测，得到不同浓度细菌溶液对应的拉曼强度，建立细菌浓度与拉曼强度之间的标准曲线；S4、细菌种类和浓度检测，具体步骤如下：S4.1、采用FKC-1浮游菌采集器对空气中细菌进行收集，首先配制Luria-Bertani培养基，在直径为90mm的培养皿中加入5mL配置好的培养基，设置浮游菌采集器收集参数为4000L，进行空气中收集；S4.2、取1mL收集到的空气中细菌溶液以4000rmin的转速离心10min收集菌体，加入1mL浓度为10mM的NH4HCO3溶液进行重悬，再加入10uL浓度为1M的NaCl，混合后进行拉曼检测，同时取100uL未进行任何处理的空气中细菌初始溶液进行涂布并在37℃下培养24h；S4.3、根据步骤S3建立的标准曲线即可得到步骤S4.2中细菌的种类及对应浓度，根据已知的溶液含量计算细菌的数量，根据细菌数量计算出所取待检测细菌溶液的浓度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京数字天眼生物科技有限公司 一种定性定量病原微生物的快速检测方法

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