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一种具有表皮嵴的全层组织工程皮肤制备方法 

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申请/专利权人:太原理工大学

摘要:本发明公开了一种具有表皮嵴的全层组织工程皮肤制备方法,属于生物皮肤制备技术领域;本方法为先在表层为波浪状的细胞培养基质上制备表皮组织层,再制备附着在温度响应性培养基上的表皮细胞片,然后将细胞培养基质连同表皮组织层倒扣在表皮细胞片上进行连接融合,加入胶原酶进行孵育将细胞培养基质分解掉,在表皮组织层上方浇注含有真皮成纤维细胞的预聚合溶液形成皮肤真皮成纤维细胞层,将温度响应性培养基底与表皮细胞片脱离,之后培养形成含有表皮嵴的全层皮肤组织;本发明方法可以保证含有表皮嵴的全层皮肤的完整性;解决了组织工程皮肤制备中,水凝胶无法同时兼顾表皮结构和真皮生长的问题。

主权项:1.一种具有表皮嵴的全层组织工程皮肤制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1)制备表皮组织:在细胞培养基质(1)上接种人皮肤表皮细胞,经过培养形成表皮组织层(2),所述细胞培养基质(1)为GelMAPEGDA复合水凝胶,细胞培养基质(1)的表层为波浪状结构;2)制备表皮细胞片:在温度响应性培养基底(4)上接种人皮肤表皮细胞,使人皮肤表皮细胞充分贴壁且通过增殖融合,形成单层贴壁的表皮细胞片(3);3)将细胞培养基质(1)连同表皮组织层(2)倒扣在表皮细胞片(3)上,连同温度响应性培养基底(4)进行培养,使表皮组织层(2)与表皮细胞片(3)通过细胞间连接融合形成复合体;4)在所述复合体中加入胶原酶进行孵育将细胞培养基质(1)分解掉,使表皮组织层(2)的波浪形表层暴露;5)在表皮组织层(2)上方浇注含有真皮成纤维细胞的预聚合溶液,预聚合溶液固化在表皮组织层(2)融合形成皮肤真皮成纤维细胞层(5);所述的预聚合溶液为水凝胶和真皮成纤维细胞的混合液;6)将温度响应性培养基底(4)通过温度调节与表皮细胞片(3)脱离,将依次融合的表皮细胞片(3)、表皮组织层(2)和皮肤真皮成纤维细胞层(5)进行培养形成具有表皮嵴的全层皮肤组织。

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