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申请/专利权人：兰州大学
摘要：本发明公开了一种中华羊茅成熟胚愈伤组织诱导及再生体系建立方法，步骤为：1将中华羊茅种子依次进行内生真菌去除处理以及消毒处理；2消毒后的中华羊茅种子，依次放入诱导培养基、继代培养基、分化和增殖培养基和生根培养基中培养，待分化苗的根长度为5～7cm；3将苗移出，闭瓶炼苗后，注入自来水，开瓶炼苗，然后洗净根部，使用灭菌后的蛭石培养，获得完整的再生植株。本发明选择中华羊茅成熟胚为外植体进行植物组织再生培养，所需材料低廉易得，操作过程简单宜行，此外，本发明得到的中华羊茅成熟胚愈伤组织及其再生体系，为基因编辑以及中华羊茅种质创新提供重要的基础材料。
主权项：1.一种中华羊茅成熟胚愈伤组织诱导及再生体系建立方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）将中华羊茅种子依次进行内生真菌去除处理以及消毒处理；（2）将种子对半切开置于PH=5.8~5.9的诱导培养基中，在恒温26±1℃下黑暗培养44~46d；所述诱导培养基为：基础培养基+2mgL2,4-D+0.05mgL6-BA；（3）转入PH=5.8~5.9的继代培养基中培养29~31d；继代培养基为：基础培养基+2mgL2,4-D+0.05mgL6-BA；（4）转入PH=5.7的分化和增殖培养基中进行光照培养至苗长为2~3cm；所述分化和增殖培养基为：基础培养基+2mgL6-BA+0.5mgLNAA；（5）转入PH=5.7的生根培养基培养至待分化苗的根长为5~7cm；所述生根培养基为基础培养基；（6）将苗移出，闭瓶炼苗，2d后注入自来水，开瓶炼苗3d，然后洗净根部，使用灭菌后的蛭石培养，获得完整的再生植株；在步骤（1）中，所述内生真菌去除处理为：将种子放置于65℃烘干箱内45d；在步骤（1）中，所述消毒处理为：将种子依次用50%H2SO4浸泡12min、75%C2H5OH浸泡2min、50%84浸泡20min；在步骤（2）~（5）中，所述基础培养基为：4.33gLMSsalts粉末+30gL麦芽糖+3.5gL植物凝胶。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 兰州大学 一种中华羊茅成熟胚愈伤组织诱导及再生体系建立方法
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