首页 专利交易 科技果 科技人才 科技服务 国际服务 商标交易 会员权益 IP管家助手 需求市场 关于龙图腾
 /  免费注册
到顶部 到底部
清空 搜索

一种大片段DNA组装方法及其应用 

买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!

申请/专利权人:南开大学

摘要:本发明属于基因工程技术领域,公开了一种大片段DNA组装方法及其应用。本发明将大片段DNA通过PCR方式转变为小片段DNA,然后将小片段DNA交替整合到含有两种不同抗性基因氯霉素抗性基因、四环素抗性基因的pBR322质粒上,接着再将这些新构建的质粒依次转化到底盘细胞中,实现大片段DNA的组装。本发明大片段DNA组装方法可方便、高效地对酿酒酵母染色体进行组装,为人工设计合成酿酒酵母长染色体提供了基础。同时,采用本发明组装方法能够在枯草芽孢杆菌体内组装一条完整的PNP降解途径,并成功构建了高效PNP矿化工程菌,该方法构建的工程菌具有与野生菌株相似的生长趋势,外源基因能够稳定表达,实现PNP矿化功效,为农业环境的修复提供一种可行方案。

主权项:1.一种大片段DNA组装方法,其特征在于,包括将线性化pBR322序列和抗性基因序列整合到枯草芽孢杆菌菌株的metI基因位点上,得到底盘细胞;分别将四环素抗性基因或氯霉素抗性基因插入到pBR322质粒上,得到两种分别含有不同抗性基因的质粒载体;将需要组装的大片段DNA拆分成两端含有同源序列的小片段DNA,将小片段DNA交替插入到两种含有不同抗性基因的质粒上;将携带这些小片段DNA的两种质粒依次转化到底盘细胞中,实现大片段DNA的组装。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南开大学 一种大片段DNA组装方法及其应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。