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申请/专利权人：西安菌佑医疗科技发展有限公司
摘要：本发明公开了一种基于PMA‑qPCR检测活菌量的方法及应用，尤其涉及利用PMA‑qPCR检测人体肠道微生物活菌量的方法，属于微生物检测领域。本发明采用了不同样本类型对PMA‑qPCR在活菌量检测应用的探究，包括未经处理的原始粪便、经过滤除杂的浓缩粪菌泥、添加辅料冻干的粪菌粉以及加最终保护剂的粪菌胶囊样本。本发明使用内标法、控制变量法等方法联合摸索PMA对复杂样本的最佳处理条件，包括样本的稀释倍数、PMA浓度、光照时间和暗反应时间，并进一步验证结果的可信性。
主权项：1.一种活菌定量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1样品预处理：取待测样本0.05～0.2g，加入生理盐水重悬，稀释50～200倍；2PMA处理：向步骤1中稀释后的样品加入终浓度60～100mMPMA，避光反应5-20min，将样品置于冰上，卤素灯照射5～15min；3样本DNA提取：对步骤2PMA处理后的样本进行DNA提取；4qPCR检测活菌数目：利用引物5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’和5’-CAGCMGCCGCGGTAA-3’进行qPCR。
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权利要求：
百度查询： 西安菌佑医疗科技发展有限公司 一种基于PMA-qPCR检测活菌量的方法及应用
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