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申请/专利权人：凯莱英医药集团(天津)股份有限公司;天津凯莱英生物科技有限公司
摘要：本发明提供了一种制备Cemdisiran的方法。其中，Cemdisiran为siRNA，由正义链和反义链通过互补配对组成；制备方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，利用RNA连接酶催化正义链底物之间和反义链底物之间以磷酸二酯键连接，获得正义链和反义链，从而获得Cemdisiran；正义链底物能够组成正义链，反义链底物能够组成反义链。相较于利用化学合成制备Cemdisiran，本申请的制备方法获得的产物纯度较高、杂质少，且反应条件温和，便于实现工业化放大生产。
主权项：1.一种制备Cemdisiran的方法，其特征在于，所述Cemdisiran为siRNA，由正义链和反义链通过互补配对组成；所述方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，其中，所述正义链底物能够组成所述正义链，所述反义链底物能够组成所述反义链；所述正义链底物和所述反义链底物以碱基互补形成的氢键连接，所述正义链底物和所述反义链底物的头尾碱基之间均未互相连接，形成含有缺刻的双链核苷酸结构；利用所述RNA连接酶将所述缺刻两端的碱基以磷酸二酯键连接，形成所述Cemdisiran；所述缺刻两端的所述碱基分别为不同底物的5’端和3’端，所述5’端为磷酸根，所述3’端为羟基；利用所述RNA连接酶连接所述缺刻上下游的所述5’端的磷酸根和所述3’端的羟基，形成所述磷酸二酯键，获得所述Cemdisiran；所述RNA连接酶选自RNA连接酶家族1或RNA连接酶家族2；所述RNA连接酶包括SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5或SEQIDNO：6所示的RNA连接酶中的一种或多种；或与SEQIDNO：1-SEQIDNO：6中所示的任一RNA连接酶具有70%以上同一性，且具有催化所述磷酸二酯键形成活性的酶。
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