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一种急性心肌梗死早期诊断试剂盒及其制备方法 

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申请/专利权人:大连医科大学附属第二医院

摘要:本发明属于试剂盒制备领域,具体涉及一种急性心肌梗死早期诊断试剂盒及其制备方法。本发明的试剂盒具体对与急性心肌梗死早期诊断相关的miRNA‑208、miRNA‑124、miRNA‑203、miRNA‑133进行检测。将DNA‑酶连接物固定在纳米材料上,当待测样品中含有miRNA时,miRNA可以激活CRISPR‑Cas12a系统中AsCas12a蛋白的反式切割活性,从而释放与DNA连接的酶,通过显色反应将对miRNA的检测转化为颜色信号,本发明制备的试剂盒优势在于,在不进行扩增的情况下对miRNA进行检测,可以不完全依赖于专业仪器,必要情况下减少使用限制,对急性心肌梗死早期诊断效果较佳。

主权项:1.一种急性心肌梗死早期诊断试剂盒,其特征在于,急性心肌梗死早期诊断试剂盒包含以下质量份数的原材料:3-5份剪切试剂、6-8份酶反应试剂、1-2份样品试液;所述剪切试剂包含以下质量份数的材料:5-10份纳米材料、6-8份DNA-酶连接物、3-5份CRISPR-Cas12a系统;所述DNA-酶连接物是序列为5’-SH-TTTTTTTTTTGACTATTTATTTTAGTCCG-X-3’的修饰后DNA片段,其中SH为巯基,X为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶或β-半乳糖苷酶;所述CRISPR-Cas12a系统由AsCas12a蛋白和crRNA序列组成,crRNA序列包含crRNA-208序列、crRNA-124序列、crRNA-203序列、crRNA-133序列,任一crRNA序列与AsCas12a蛋白的体积比均为20-30:1。

全文数据:

权利要求:

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