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申请/专利权人：江西富祥药业股份有限公司;江南大学
摘要：本发明公开了一种高通量筛选高产菌体蛋白的短柄镰刀菌菌株的方法和应用，属于生物工程技术领域。本发明通过结合液滴微流控和流式细胞仪，通过关联蛋白质与RNA的关系，以SYTORNAselect染料再注射的方式实现了对短柄镰刀菌高产菌体蛋白菌株的筛选，并获得了一系列菌体蛋白产量提升的突变菌，如产量提升9.52％的短柄镰刀菌FXFB‑1。由于丝状真菌不能直接用流式细胞仪进行荧光检测，故本发明不但可以筛选高产菌体蛋白菌株，也适用于高通量筛选丝状真菌高产分泌蛋白菌株等。本发明提供的方法为短柄镰刀菌的高通量筛选及高产菌体蛋白的丝状真菌的高通量筛选奠定了基础，具有广阔的工业应用前景。
主权项：1.一种高通量筛选高产菌体蛋白的短柄镰刀菌菌株的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、构建短柄镰刀菌孢子突变体库；S2、将S1的短柄镰刀菌孢子突变体库和培养基的混合物包裹进直径为200-250μm的微液滴中；S3、培养20-30小时并使孢子形成丝状菌体后，向微液滴中注射RNA专一性染料进行菌丝的RNA染色，通过荧光强度筛选出正向突变体，随后采用流式细胞术对正向突变体进行分选并复筛，得到高产菌体蛋白的短柄镰刀菌菌株。
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百度查询： 江西富祥药业股份有限公司 江南大学 一种高通量筛选高产菌体蛋白的短柄镰刀菌菌株的方法和应用
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