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申请/专利权人：杭州昱鼎生物科技有限公司
摘要：本发明是一种吸附柱法，特别涉及一种体液中提取外泌体的钠基蒙脱石Na‑MMT吸附柱法。利用Na—MMT柱进行提取外泌体。该方法简单新颖易操作，成本低，且提取的外泌体纯度高，电镜下检测杂质少，背景极低。
主权项：1.一种钠基蒙脱石（Na-MMT）吸附柱法提取体液中外泌体的方法，其特征在于按以下步骤进行：①提取样本体液，样本体液包括尿液﹑血浆﹑血清和脑脊液，经过离心预处理；②先后用0.8um和0.22um针头式过滤器对预处理后的上清液进行过滤；③取适量过滤后样本，Na-MMT柱和PBS于30℃的温度中，水浴30分钟，使得与水浴锅设置温度一致；适量PBS于60℃水浴30min以上使得与水浴锅设置温度一致，需要时拿出来使用；④水浴锅中快速取出Na-MMT柱，取出水浴锅中的提取样本，上样，待下端无液体流出；⑤在温度为30℃加入适量的PBS进行清洗，待下端无液体流出；⑥在温度为60℃中加入PBS进行洗脱，接取外泌体0.5-5ml，在温度为-80℃下进行冷冻保存；步骤⑥中，如需提高外泌体浓度，使用100KD超滤管4℃，3000r离心15min后再使用少量PBS洗脱超滤膜，回收外泌体；或直接接取外泌体浓度较高的体积0.5-2ml；Na-MMT柱包括针筒空管（1）、筛板（2）、尼龙网格滤膜（3）、钠基蒙脱石颗粒（4）、上盖（5）和底盖（6），所述的针筒空管（1）的上端与底端分别设有筛板（2），所述的底盖（6）设在底端筛板（2）的底部，上端筛板（2）的下方设有尼龙网格滤膜（3），所述的尼龙网格滤膜（3）与底端筛板（2）间设有均匀分布的钠基蒙脱石颗粒（4），所述的针筒空管（1）的上部设有上盖（5）；钠基蒙脱石颗粒的直径为2-4mm；尿液样本的清洗体积为0-0.5ml，血浆样本的清洗体积为0.5-1ml；尿液样本为晨尿。
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百度查询： 杭州昱鼎生物科技有限公司 一种体液中提取外泌体的钠基蒙脱石（Na-MMT）吸附柱法
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