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申请/专利权人：广州市天河诺亚生物工程有限公司
摘要：本发明涉及一种外泌体载药系统的制备方法及其产品和应用，所述制备方法包括将外泌体、siRNA和电转缓冲液混合孵育，电转，得到第一混合液；将第一混合液与外泌体分离试剂混合，孵育，得到第二混合液；将第二混合液离心，即得。本发明所述的载药系统省时、可重复性高，可以通过负载各种不同功能的siRNA来实现对细胞或疾病的不同治疗作用。较之现有技术，本发明提供的载药系统能够把容易被环境RNA酶酶解的siRNA载入外泌体内，减少siRNA的损失，有利于siRNA更好地实现其调节功能。
主权项：1.一种外泌体载药系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：（1）将外泌体、siRNA和电转缓冲液混合孵育，电转，得到第一混合液；（2）将第一混合液与外泌体分离试剂混合，孵育，得到第二混合液；（3）将第二混合液离心，即得；所述外泌体由包括如下步骤的方法制得：利用ficoll密度梯度离心的方法，从脐血中分离脐带血单个核细胞；利用添加脐血浆的间充质干细胞培养基对脐带血单个核细胞进行培养，经培养至P4代后获得脐血源间充质干细胞；收集P4代脐血源间充质干细胞的培养基，分离提取出脐血源间充质干细胞的外泌体，外泌体的初始浓度为12mgmL；所述外泌体与siRNA的质量比为3-5:1；所述电转包括脉冲电转，条件如下：电压：380-420V，电容：120-130μF，电阻：40-60Ω，脉冲时间：2.5-3.5ms，脉冲次数：4-6次，脉冲间隔：55-65s；步骤（1）所述孵育的温度为4-20℃，时间为30-60min；所述siRNA的序列包括SEQIDNo.1-2的组合、SEQIDNo.3-4的组合或SEQIDNo.5-6的组合。
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权利要求：
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