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一种提高里氏木霉基因编辑效率的质粒及其应用 

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申请/专利权人:山东大学

摘要:本发明提供了一种提高里氏木霉基因编辑效率的质粒及其应用,属于基因工程技术领域。本发明中,通过靶向敲除里氏木霉中的ku70基因,提高同源重组效率;通过优化基因编辑酶的核酸序列,组合其启动子和终止子,并在同一个质粒上表达sgRNA,提高切割效率;此外,在一个基因表达盒中,串联多个基因靶点,实现多基因敲除,进一步提高基因编辑效率。本发明提供的载体及方法,结合crispr‑cas9技术在里氏木霉中能够实现单基因敲除效率100%,双基因敲除效率82%以上,大大提高里氏木霉基因编辑效率,为进一步改造里氏木霉性状或功能基因研究提供了有力的保障。

主权项:1.一种cas9表达盒,其特征在于,所述表达盒从5’-3’依次连接pdc启动子、cas9编码基因、pdc终止子;所述cas9编码基因的核酸序列如SEQIDNO.1所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东大学 一种提高里氏木霉基因编辑效率的质粒及其应用

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