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申请/专利权人:昆山亚香香料股份有限公司
摘要:本发明公开了一种利用重组大肠杆菌生物合成肉桂酸的方法,本发明将提供的苯丙氨酸解氨酶基因构建到大肠杆菌表达载体并转化入大肠杆菌细胞中进行表达,获得的重组菌株用于粗酶的表达和提取。反应通过离心、调整pH至白色沉淀析出,沉淀经由洗涤冻干等步骤得到纯度98%的肉桂酸,通过本方法提取所得的肉桂酸具有较广泛的工业应用价值。
主权项:1.一种重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌由重组质粒导入宿主大肠杆菌中得到,所述重组质粒是由密码子优化后的PAL的编码基因与表达载体pDuet连接构建而成;所述所述PAL为来源于黄瓜CuPAL、酿酒葡萄VvPAL、蒺藜苜蓿MtPAL、花生AhPAL、芒果MiPAL、甜橙CiPAL以及CiPAL的突变体中的一种或多种;所述黄瓜CuPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述酿酒葡萄VvPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,所述蒺藜苜蓿MtPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,所述花生AhPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示,所述芒果MiPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示,所述甜橙CiPAL的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示,所述CiPAL突变体CiPAL-F139H的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示,所述CiPAL突变体CiPAL-S1的氨基酸序列如SEQIDNO.8所示,所述CiPAL突变体CiPAL-S2的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示,所述CiPAL突变体CiPAL-S3的氨基酸序列如SEQIDNO.10所示,所述CiPAL突变体CiPAL-S3K134D的氨基酸序列如SEQIDNO.11所示。
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权利要求:
百度查询: 昆山亚香香料股份有限公司 一种利用重组大肠杆菌生物合成肉桂酸的方法
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