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申请/专利权人：海南大学
摘要：本发明属于生物技术领域，提供了一种抗夜来香花叶病毒的弱毒疫苗R181D及其应用，其以TelMV侵染性克隆质粒pPasFru为模板，以HCPro‑F、HCPro‑R、HCProD‑R和HCProD‑F为引物，使用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增，获得大小分别为1278bp和117bp的ab和cd片段，再以ab和cd片段的混合物为模板，获得大小为1359bp的ad片段，利用PstI、SalI双酶切ad片段以及pPasFru质粒，通过T4DNA连接酶将片段与载体进行连接，连接产物转化至大肠杆菌DH10B，获得弱毒疫苗pPasFru‑R181D；本发明通过将TelMVHCPro蛋白的第181位精氨酸突变为天冬氨酸，获得弱毒疫苗，弱毒疫苗接种百香果植株后不表现症状但病毒含量仍较高，该弱毒疫苗作用稳定，可以起到有效的交叉保护作用，为田间防控TelMV提供了新途径。
主权项：1.一种弱毒疫苗R181D，其特征在于：以TelMV侵染性克隆质粒pPasFru为模板，以HCPro-F、HCPro-R、HCProD-R和HCProD-F为引物，使用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增，获得大小分别为1278bp和117bp的ab和cd片段，再以ab和cd片段的混合物为模板，获得大小为1359bp的ad片段，利用PstI、SalI双酶切ad片段以及pPasFru质粒，通过T4DNA连接酶将片段与载体进行连接，连接产物转化至大肠杆菌DH10B，获得质粒pPasFru-R181D。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 海南大学 一种抗夜来香花叶病毒的弱毒疫苗R181D及其应用
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