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基于NanoBRET技术的NRF2泛素化检测体系、表达载体、宿主细胞及方法 

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申请/专利权人:华东理工大学

摘要:本发明提供一种NRF2泛素化检测体系,所述的检测体系包括HaloTag标签与含Ubiquitin蛋白的融合蛋白基因序列、以及NanoLuc荧光素酶与含NRF2蛋白的融合蛋白基因序列。在过量底物存在下,共表达NRF2‑NanoLuc及HaloTag‑Ubiquitin的融合蛋白的细胞株能产生显著的NanoBRET信号。本发明能够高通量检测NRF2泛素化,是一种适用于细胞水平的定量的泛素化检测体系,可应用于具有NRF2相关抗肿瘤药物的天然药物和人工合成的化合物的作用机制探索。

主权项:1.一种用于检测NRF2泛素化的融合蛋白,其特征在于,所述的融合蛋白从N端至C端具有如下式Ia或Ib所示结构:NanoLuc-L-NRF2Ia;NRF2-L-NanoLucIb,其中,各“-”独立地为无或肽键;NanoLuc为NanoLuc荧光素酶;L为无或连接肽;NRF2为NRF2蛋白或其功能片段。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华东理工大学 基于NanoBRET技术的NRF2泛素化检测体系、表达载体、宿主细胞及方法

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