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一种检测细胞膜蛋白-配体相互作用的ELISA方法 

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申请/专利权人:广西大学

摘要:本申请提供了一种检测细胞膜蛋白‑配体相互作用的ELISA方法,包括以下步骤:S1、在细胞培养板中培养细胞;S2、将膜蛋白基因导入细胞,使膜蛋白基因在细胞膜表面表达;S3、弃去细胞培养板中的培养液,设置对照孔和多个样品孔,在对照孔中加入PBS,在多个样品孔中加入不同稀释梯度的带小鼠Fc标签的蛋白溶液,或者加入一定浓度带小鼠Fc标签的蛋白的同时加入不同浓度待测配体溶液,孵育,洗涤;S4、弃去对照孔和多个样品孔中的液体,洗涤;加入稀释的小鼠二抗,孵育,洗涤;S5、在对照孔和多个样品孔中加入混合显色液,孵育;S6、在对照孔和多个样品孔中加入终止液,读取OD值。本申请提供的ELISA方法具有过程简单,时间、经济成本低,特异性强等优点。

主权项:1.一种检测细胞膜蛋白-配体相互作用的ELISA方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、在细胞培养板中培养细胞;S2、将膜蛋白基因导入所述细胞,使所述膜蛋白基因在细胞膜表面表达;S3、弃去所述细胞培养板中的培养液,设置对照孔和多个样品孔,在所述对照孔中加入PBS,在所述多个样品孔中加入不同稀释梯度的带小鼠Fc标签的蛋白溶液,孵育,洗涤;或者,在待测配体并不是带小鼠Fc标签的蛋白溶液时,在所述多个样品孔中加入预设浓度带小鼠Fc标签的蛋白的同时,加入不同浓度的待测配体溶液,孵育,洗涤;S4、弃去所述对照孔和所述多个样品孔中的液体,洗涤;加入稀释的二次抗体,孵育,洗涤;S5、在所述对照孔和所述多个样品孔中加入混合显色液,孵育;S6、在所述对照孔和所述多个样品孔中加入终止液,读取OD值。

全文数据:

权利要求:

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