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申请/专利权人：广州市第一人民医院(广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院);四川艾能捷新材料科技有限公司

摘要：本发明属于医药技术领域，提供了一种鱼腥草来源细胞外囊泡在制备防治溃疡性结肠炎药物中的应用，本发明通过构建葡聚糖硫酸钠DSS诱导的结肠炎小鼠模型，发现鱼腥草来源细胞外囊泡对于溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用，可以改善小鼠腹泻、血便、结肠缩短及体重下降情况，降低小鼠疾病活动指数DAI评分。提取纯化的鱼腥草来源细胞外囊泡能够降低结肠组织细胞中相关炎症因子IL‑6、TNF‑α和IL‑1β的表达水平，发挥抗炎作用；同时通过增加屏障相关因子Occludin、MUC‑2及ZO‑1相对表达水平来发挥屏障保护作用。因此，本发明证实了鱼腥草来源细胞外囊泡可以用于预防或治疗溃疡性结肠炎，为临床防治IBD的新药物开发提供了新的理论依据和实验基础，并具有较好的应用前景。

主权项：1.一种鱼腥草来源细胞外囊泡在制备防治溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：所述鱼腥草来源细胞外囊泡是由包括以下步骤的提取方法制得：步骤1：将新鲜鱼腥草清洗干净，后用双蒸水冲洗，沥干表面水分；步骤2：将步骤1晾干水分的鱼腥草根茎切碎，加入磷酸盐缓冲液研磨后过滤，弃去滤渣，收集滤液；步骤3：将步骤2所得滤液在4℃下1500xg离心10-15min；弃去沉淀，取其上清液，在4℃下3500xg离心10-15min；弃去沉淀，取上清液，在4℃下10000xg离心20-30min，收集上清液；步骤4：将步骤3所收集的上清液置于固定角转子中，4℃下100000xg离心20-30min，随后弃去上清液，用磷酸盐缓冲液重悬沉淀，随后过0.22μm的滤膜，得到悬液；步骤5：将收集的悬液从顶部加入从下而上依次装有60wt％、45wt％、30wt％蔗糖溶液的超速离心管中，然后在4℃下140000xg超速离心60-90min；步骤6：将步骤5蔗糖溶液中的细胞外囊泡条带吸出，加入三倍体积的磷酸盐缓冲溶液混合均匀，在4℃下150000xg继续超速离心60-90min除去蔗糖溶液；步骤7：收集步骤6所得沉淀，加入1ml磷酸盐缓冲液重悬，用0.22μm的滤膜进行过滤除菌，即得到鱼腥草细胞外囊泡，滤液分装并于-20℃下低温保存。

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