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申请/专利权人：华中科技大学
摘要：本发明涉及一种酪醇衍生物及其制备方法与应用。所述酪醇‑α‑半乳糖苷的制备方法包括：构建蜜二糖浓度为0.25～1.5M、酪醇浓度为10～500mM、α‑半乳糖苷酶浓度为1.25～10UmL的反应体系，然后在40～75℃条件下反应0.5～6h，升温至90～100℃终止反应，离心，将上清液真空冷冻干燥后，经分离制得酪醇‑α‑半乳糖苷；所述α‑半乳糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。本发明提供的酪醇‑α‑半乳糖苷对于神经炎症具有抑制作用，可作为新的治疗神经炎症的先导化合物。并且本发明是采用特定的α‑半乳糖苷酶，以蜜二糖为糖基供体，一步高效合成酪醇‑α‑半乳糖苷，条件温和，环保绿色，步骤简单，大大降低了生产成本，应用前景广阔。
主权项：1.酪醇-α-半乳糖苷在制备缓解神经炎症药物中的应用，其特征在于，所述酪醇-α-半乳糖苷的分子式为C14H20O7，化学结构式如下： ；所述酪醇-α-半乳糖苷的制备方法，包括以下步骤：构建蜜二糖浓度为0.25~1.5M、酪醇浓度为10~500mM、α-半乳糖苷酶浓度为1.25~10UmL的反应体系，然后在40~75℃条件下反应0.5~6h，升温至90~100℃终止反应，离心，将上清液真空冷冻干燥后，经分离制得酪醇-α-半乳糖苷；所述α-半乳糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；所述α-半乳糖苷酶的制备方法如下：（1）将如SEQIDNo.1所示的α-半乳糖苷酶基因序列克隆到大肠杆菌表达载体pET-35b中，构建重组表达载体pET-35-aga，然后将表达载体转化到大肠杆菌中，用卡那霉素抗性筛选出含α-半乳糖苷酶的重组菌株；（2）将步骤（1）筛选出的重组菌株接种于LB液体培养基中，在37℃、200rpm下培养过夜，获得种子液；将种子液按照体积比0.5~1.5%接种于LB液体培养基中，待生长到OD600为0.6时，加入终浓度为0.5~1.5mM的IPTG进行诱导，得到诱导后获得的菌体；（3）收集步骤（2）诱导后获得的菌体，超声破碎后，离心获得包涵体沉淀，即为α-半乳糖苷酶。
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百度查询： 华中科技大学 一种酪醇衍生物及其制备方法与应用
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