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一种基于多米诺步行器检测HBV的电化学适配体传感器 

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申请/专利权人:商丘师范学院

摘要:本发明属生物传感器检测和DNA纳米技术领域,涉及一种基于多米诺步行器检测HBV的电化学适配体传感器。本发明通过预先设计发卡DNA轨道,并利用四面体DNA作为底座,制备网格状的DNA发卡轨道,为发卡轨道提供刚性支撑,并调节其密度和朝向,使DNA轨道高度有序并保持适当的距离,有助于提高DNA探针之间的杂交效率和信号探针的分支迁移速率。将传统逐步行走转变为一步触发多米诺式机制,无需额外添加燃料动力分子,简化操作步骤、节约大量时间。目标物直接诱导发卡轨道发生杂交链式反应,触发多米诺步行机制,致使信号探针发生分支迁移,离开传感界面。该策略无酶、简单、易操作且避免了传统步行器中额外驱动组分的加入,实现对HBV的快速检测,检出限为1.27fM,为多种生物标志物的灵敏检测开辟了新的途径。

主权项:1.一种检测乙肝病毒HBV的电化学适配体传感器,其特征在于,通过如下方法制备而成:(1)制备四面体网格状发卡轨道:将A1、发卡探针Hp1和标记有巯基的B1、C1、D15种单链DNA以等摩尔比混合于含有TCEP的TM缓冲液中,制备DNA四面体发卡探针T1;将A2、发卡探针Hp2和标记有SH的B2、C2、D25种单链DNA以等摩尔比混合于含有TCEP的TM缓冲液中,制备DNA四面体发卡探针T2;接着,将T1和T2以等摩尔比混合,置于振荡仪中,孵化,获得DNA四面体发卡网格探针THP,备用;(2)轨道的固定及信号探针的引入:将步骤(1)制得的DNA四面体发卡网格探针THP滴入预处理过的金电极表面,然后将标记有二茂铁的信号探针Sp1和Sp2滴加至上述电极表面,孵化,制得电化学适配体传感器;所述A1、B1、C1、D1、Hp1和Sp1的DNA见序列表;所述A2、B2、C2、D2、Hp2和Sp2的DNA见序列表。

全文数据:

权利要求:

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